题目内容

4．基因工程自20世纪70年代兴起后，目前巳成为生物科学的核心技术，并在实际领域--农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面，也展示出美好的前景．请回答下列有关基因工程的问题．
（1）基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建．若选择的限制酶切出的DNA片段是平末端，应选择T4DNA连接酶进行连接．
（2）将目的基因导入到植物细胞采用最常用的方法是农杆菌转化法，该方法通常要把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中，这是利用T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上的功能．
（3）在基因工程操作中，若要在短时间内大量获取目的基因，可用PCR技术扩增DNA．该技术的原理是DNA（双链）复制．
（4）人体的遗传性疾病很难用一般药物进行治疗，基因工程的兴起迎来了基因治疗的曙光．基因治疗的思路是将正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能．

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达，其中核心步骤是基因表达载体的构建．E．coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，因此若选择的限制酶切出的DNA片段是平末端，则应选择T4DNA连接酶进行连接．
（2）将目的基因导入到植物细胞常用农杆菌转化法，该方法通常要把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中，这是利用T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上的功能．
（3）PCR技术可在体外大量扩增目的基因，其原理是DNA复制．
（4）基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建（答将目的基因和运载体结合或答构建基因表达载体得分）     T4DNA连接酶 （漏答“T4”不给分）    
（2）农杆菌转化法     Ti质粒     可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上
（3）PCR技术      DNA（双链）复制    
（4）将正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，了解基因工程技术的相关应用，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查．

练习册系列答案
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15．从温暖的室内来到寒冷的室外，人体中不会发生的是（　　）
A．机体散热量先减少后增加
B．抗利尿激素分泌减少
C．通过神经调节引起皮肤毛细血管收缩
D．通过神经-体液调节使甲状腺激素分泌增多
15．某三十九肽中共有丙氨酸（R基为-CH3）4个，现去掉其中的丙氨酸得到4条长短不等的多肽（如图），就39肽与得到的4条多肽比较，以下说法错误的是（　　）
A．该过程减少8个肽键
B．这些肽链比三十九肽增加了3个氨基和3个羧基
C．碳原子减少12个
D．氧原子数目减少1个
12．下列关于人体内环境稳态与调节的叙述，错误的是（　　）
A．胰岛素和胰高血糖素的分泌主要受血糖浓度的调节，也受神经调节
B．人体遇冷时，甲状腺激素和肾上腺素均可参与机体产热调节
C．垂体分泌的促甲状腺激素，通过体液定向运送到甲状腺
D．饮水不足会引起垂体释放抗利尿激素，促进肾小管和集合管重吸收水
19．登革热病毒入侵人体后，人体主要的免疫反应如图所示．

（1）登革热病毒入侵后，部分B细胞活化为相应的浆细胞产生特定抗体．B细胞活化为浆细胞，一般需要什么条件？病毒直接刺激和淋巴因子的作用．
（2）受病毒刺激而产生的M抗体对患者的康复是否有利？试结合上图进行简要说明．不利，M抗体促进病毒在患者体内的复制增殖，从而加重病情．
（3）患者初次感染时，14天后可以在体内检测到G抗体，再次感染时第2天就检测到G抗体．请简要解释再次感染时G抗体迅速出现原因．初次感染时患者机体产生的相关记忆细胞，在再次感染时受到病毒刺激后，迅速增殖分化成浆细胞，继而分泌大量抗体．
（4）如图显示了登革热患者康复主要依靠哪些种免疫？体液免疫．
9．某森林生态系统在遭受火灾（b点）前后，草本、灌木和乔木的生物量（某一时间单位面积或体积栖息地内，植物的地上部分的总干重）变化如图所示，下列分析正确的是（　　）
A．图中曲线Ⅰ最可能代表灌木的生物量
B．b点的生物量明显大于g点的生物量
C．b～d段草本植物进化为灌木，灌木进化为乔木
D．c～f段物种的丰富度增加，系统的稳定性增高
16．下列能说明人体细胞已经发生分化的是（　　）
A．存在胰岛素基因B．产生RNA聚合酶
C．形成组织和器官D．进行葡萄糖氧化分解
12．下列关于免疫的叙述，正确的是（　　）
A．人体被病毒感染时，抗体能通过裂解靶细胞将病原体清除
B．通过检查成年人血液中的某一抗体不能确定其是否曾受到某种特定病原体的侵袭
C．当入侵的病毒被识别后，B细胞和T细胞受到刺激，开始增殖、分化
D．异体皮肤移植失败的原因是特异性免疫产生相应抗体杀伤移植的皮肤
12．下列有关细胞分化、衰老和凋亡的叙述，正确的是（　　）
A．细胞分化影响细胞的生理功能，但不影响细胞中细胞器的种类
B．细胞代谢产生的自由基会导致细胞衰老，也可能引起基因突变
C．人体内环境的相对稳定与免疫有关，与细胞凋亡无关
D．癌细胞与效应T细胞接触后，裂解的过程不属于细胞凋亡

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