Question

4．回答有关微生物的问题．
牛奶是微生物生长的良好培养基．生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和贮藏；牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物．
为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图1所示操作．用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中，如此重复3次，将10mL生牛奶稀释到10^-4浓度后，取0.1mL滴在培养基上．

（1）巴氏消毒的方法是62℃30分钟，乳酸菌的代谢类型是厌氧异养．
（2）将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，（如图2所示）应选择的涂布工具是B．该涂布工具最合适的灭菌方法是A．
A．火焰灼烧   B．高温高压灭菌   C．酒精擦拭    D．紫外线照射
（3）检测食品中大肠杆菌数量，可评价食品是否受到污染．如表培养基配方中，大肠杆菌能够生长的是①，理由是该培养基为大肠杆菌生长提供了碳源、氮源（和无机盐）． 

成分及含量（g/L）	蛋白胨	酵母膏	葡萄糖	蔗糖	K2HPO4	NaNO3	MgSO4	NaCl	FeSO4
①	10	2	2		2			5
②					1	3	1	3	0.01
③	10	5		3				5

（4）从生牛奶取样培养得到的菌落中，混有各种杂菌，从中检测出大肠杆菌的方法是，在培养基中加入B．
A．班氏试剂    B．伊红美蓝    C．BTB     D．抗生素
（5）如图3所示，将大肠杆菌接种至培养基后，在2（填图中编号）区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是1个细菌．据图分析，在该培养基上划线接种时，划线的顺序依次是132（用编号表示）．

Answer 1

分析 图1为稀释涂布平板法，图2中A为接种环，B为涂布器，C为滴管，D为接种针．
灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，适用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等．
消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，适用对象主要有操作空间、某些液体、双手等．

解答 解：（1）巴氏消毒的方法是加热到62-65℃，保持30分钟，乳酸菌的代谢类型是厌氧异养．
（2）将液体菌种接种在固体培养基上常用的方法主要是稀释涂布平板法，所用的接种工具是涂布器．即图2中的B．为防止杂菌污染，该工具应浸泡于酒精中，涂布前应将涂布器引燃（灼烧）后待冷却．
（3）分析表格可知，①培养基为大肠杆菌生长提供了碳源、氮源（和无机盐），大肠杆菌能够生长． 
（4）检测大肠杆菌的方法是在培养基中加人伊红美蓝，菌落具有（金属光泽的紫）黑色特征的可以认定为大肠杆菌．
（5）图3中采用的接种方法是平板划线法，该方法可以把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．随着划线的进行，菌落数越来越少，因此经过培养之后，可以观察到在2区域出现单个菌落；菌落是由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，因此产生该菌落的最初细菌数目是1个．据图分析，在该培养基上划线接种时，划线的顺序依次是132．
故答案为：
（1）62℃30分钟   厌氧异养
（2）B     A   
（3）①该培养基为大肠杆菌生长提供了碳源、氮源（和无机盐）
（4）B     
（5）2   1   132

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术；识记培养基的成分、类型及功能；识记接种微生物常用的两种方法，能结合图中信息准确答题．