Question

17．如图是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．请据图回答：
（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在逆转录酶酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成双链DNA，从而获得所需目的基因；二是根据目标蛋白质的序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的序列，再通过化学方法合成所需目的基因．
（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有引物、4种脱氧核苷酸、三磷酸腺苷和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成模板DNA．PCR技术的原理是DNA双链复制．
（3）由A和载体B拼接形成C的过程通常称为基因表达载体的构建．
（4）在基因工程中，常用Ca²⁺处理D，其目的是使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子．
（5）要检测目的基因是否导入受体细胞采用技术，要检测目的基因是否表达DNA分子杂交，则采用抗原-抗体杂交技术．

Answer 1

分析 分析题图：图示是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图，其中A为目的基因，B为运载体（质粒），C为重组质粒，D为受体细胞．

解答 解（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在逆转录酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成双链DNA，从而获得所需目的基因；二是根据目标蛋白质的序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的序列，再通过化学方法合成所需目的基因．
（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有引物、4种脱氧核苷酸、三磷酸腺苷和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成模板DNA．PCR技术的原理是 DNA双链复制．
（3）由A和载体B拼接形成C的过程通常称为基因表达载体的构建．
（4）在基因工程中，常用Ca²⁺处理D，其目的是使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子．
（5）要检测目的基因是否导入受体细胞采用DNA分子杂交技术，要检测目的基因是否表达，则采用抗原-抗体杂交技术．
故答案为：
（1）逆转录酶　  DNA聚合酶 　目的    目的
（2）引物　模板DNA   DNA双链复制
（3）基因表达载体的构建
（4）使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子   
（5）DNA分子杂交    抗原-抗体杂交

点评 本题结合制备“工程菌”的示意图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．