Question

4．在农业生产研究上，常需要进行微生物分离，培养和技术．
（1）下表为两种微生物的培养基配方
A组

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g

B组

纤维素粉	NaNO3	Na2HPO4•7H2O	KH2PO4	MgSO4•7H2O	KCL	酵母膏	水解酪素
5g	1g	1.2g	0.9g	0.5g	0.5g	0.5g	0.5g

上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1000mL
1从功能上来看，上述两种培养基均属于选择培养基．
2如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择上述哪种培养基A，该培养基中的碳源是葡萄糖．
3在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入酚红指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现红色．
（2）下面是某同学采用的接种微生物的方法，回答：
①本实验宜采用接种微生物的方法是平板划线法，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一个目的，操作上应注意：每次划线前接种环要灼烧、冷却后从上一次划线的末端开始划线（至少答2项）
②三位同学用稀释涂布平板法则定同一土壤样品中细菌数量，在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，得到以下统计结果：
甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；
丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163，
在三位同学的统计中，乙同学的统计是正确的．

Answer 1

分析 培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．筛选和分离微生物需要使用选择培养基．微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法．微生物培养的关键是无菌操作．据图分析：图示表示平板划线法操作的过程．

解答 解：（1）1、据题表中的培养基的配方分析，A组中的氮源为尿素，应该是筛选尿素分解菌的选择培养基．B组中的碳源是纤维素，应该是筛选纤维素分解菌的选择培养基．
2、对土壤中分解尿素的细菌进行分离，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，应当选择A组培养基．该培养基中的碳源是葡萄糖．
3、尿素分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定．尿素分解菌产生的脲酶能够将尿素分解为氨而使pH升高，使酚红指示剂呈红色．
（2）①据图分析，图示表示平板划线法接种，是把聚集的菌种逐步稀释到培养基的表面，操作上应注意每次划线前接种环要灼烧、冷却后从上一次划线的末端开始划线．
②在进行平板菌落计数时，应选择30～300之间的菌落进行计数，同时为避免误差应选择至少3个或3个以上的平板进行计数并去平均值．
故选：乙．
故答案为：
（1）1、选择
2、A    葡萄糖
3、酚红   红色
（2）①平板划线    稀释   每次划线前接种环要灼烧、冷却后从上一次划线的末端开始划线
②乙

点评 本题主要考查微生物的实验室培养的相关知识，意在强化学生对微生物培养过程的操作及相关知识的识记、理解与掌握．