Question

7．野生酵母菌虽可以利用多种碳源，但对淀粉的利用率较低，因此有科学家将其他生物的ɑ-淀粉酶基因导入野生酵母中以获得工程酵母，回答下列问题：
（1）以酵母菌为受体细胞时，适于用作基因工程运载体的是质粒．
（2）野生酵母菌可以将淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖，这一过程发生在酵母菌细胞外（填“细胞外”或“细胞内”）．
（3）将ɑ-淀粉酶基因导入野生酵母后，由于导入成功率不高，可以将这些酵母菌进行梯度稀释后涂布于含有刚果红的鉴别（填“选择”或“鉴别”）培养基上，透明圈大的菌落即为成功导入并表达目的基因的酵母菌菌落．
（4）导入目的基因成功的酵母菌菌种可以置于液体（填“固体”或“液体”）培养基中，在
有氧（填“有氧”或“无氧”）条件下扩大培养．
（5）若要长期保存优良的工程酵母菌种，可以将酵母菌液与等量的甘油混匀，置于-20℃的条件下保存．

Answer 1

分析 1、“分子运输车”--载体
（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存．
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入．
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择．
（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子．
（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒
2、培养基按物理性质分：

名称	特征	功能
固体培养基	外观显固体状态的培养基	主要用于微生物的分离、鉴定
液体培养基	呈液体状态的培养基	主要用于工业生产

解答 解：（1）以酵母菌为受体细胞时，适于用作基因工程运载体的是质粒．
（2）野生酵母菌可以将淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖，由于淀粉属于生物大分子，不能进入酵母菌细胞，因此酵母菌会将淀粉酶分泌到细胞外，水解淀粉．
（3）目的基因导入受体细胞后，需要对目的基因鉴定检测和鉴定，因此可以将这些酵母菌进行梯度稀释后涂布于含有刚果红的鉴别培养基上，透明圈大的菌落说明产生的淀粉酶将淀粉，即该菌落为成功导入并表达目的基因的酵母菌菌落．
（4）导入目的基因成功的酵母菌菌种可以置于液体培养基中，酵母菌在有氧呼吸条件下大量繁殖，即在有氧条件下扩大培养．
（5）若要长期保存优良的工程酵母菌种，可以将酵母菌液与等量的甘油混匀，置于-20℃的条件下保存．
故答案为：
（1）质粒
（2）麦芽    细胞外
（3）鉴别    透明圈大 
（4）液体    有氧
（5）甘油

点评 本题考查了基因工程和微生物分离和培养的有关知识，要求考生掌握基因工程的原理、工具以及操作步骤等，掌握培养基的类型以及微生物保存的方法等．