Question

7．表皮生长因子受体（EGFR）在某些癌细胞表面明显增多，针对EGFR的靶向治疗越来越受到研究者的关注．
（1）研究者提取了癌细胞表面的EGFR，并注射到小鼠体内．一段时间后，取小鼠的脾脏组织，剪碎后用胰蛋白酶使其分散成单个细胞．将得到的脾脏细胞与骨髓瘤细胞诱导融合后，依次通过选择培养基筛选和抗体阳性（或“抗原-抗体杂交”）检测，筛选得到所需的杂交瘤细胞，并从细胞培养液中获得待测单克隆抗体．
（2）研究者将待测单克隆抗体作为抗原注射到异种动物体内进行免疫，制备出抗EGFR单克隆抗体的抗体，然后将辣根过氧化物酶与该抗体结合，制备出酶标记抗体．将EGFR结合到固相载体上，加入待测的单克隆抗体，再将酶标记抗体加入反应体系．然后向反应体系中加入白色底物（可被辣根过氧化物酶催化形成蓝色产物），反应体系中蓝色的深浅可以反映出待测单克隆抗体的含量．
（3）研究者分析所制备单克隆抗体的蛋白质结构，设计新的氨基酸序列，通过分子生物学的手段对控制合成该抗体的基因进行修饰改造，从而解决鼠源抗体在人体内的免疫排斥问题．研究者要利用大肠杆菌来表达新的单克隆抗体，降低生产成本，还需要解决抗体在大肠杆菌细胞内翻译后无法正确加工的问题．

Answer 1

分析 1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体．
2、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．
3、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．

解答 解：（1）取小鼠的脾脏组织，剪碎后用胰蛋白酶使其分散成单个细胞．将得到的脾脏细胞与骨髓瘤 细胞诱导融合后，依次通过选择培养基筛选和抗体阳性检测，筛选得到所需的杂交瘤细胞，并从细胞培养液中获得待测单克隆抗体．
（2）研究者将待测单克隆抗体作为抗原注射到异种动物体内进行免疫，制备出抗EGFR单克隆抗体，然后将辣根过氧化物酶与该抗体结合，制备出酶标记抗体．将EGFR结合到固相载体上，加入待测的单克隆抗体，再将酶标记抗体加入反应体系．然后向反应体系中加入白色底物（可被辣根过氧化物酶催化形成蓝色产物），反应体系中蓝色的深浅可以反映出待测单克隆抗体的含量．
（3）研究者分析所制备单克隆抗体的蛋白质结构，设计新的氨基酸序列，通过分子生物学的手段对控制合成该抗体的基因进行修饰改造，从而解决鼠源抗体在人体内的免疫排斥问题．研究者要利用大肠杆菌来表达新的单克隆抗体，降低生产成本，还需要解决抗体在大肠杆菌细胞内翻译后无法正确加工的问题．
故答案为：
（1）胰蛋白酶     骨髓瘤     抗体阳性（或“抗原-抗体杂交”）
（2）抗EGFR单克隆抗体      EGFR     蓝色的深浅
（3）基因     正确加工

点评 本题考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查．