Question

4．（一）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株．回答问题．
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于选择培养基．
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）筛选高效菌株时，可比较单菌落周围分解圈（透明圈），分解圈越大说明该菌株的降解能力强．
（4）细菌种群进化过程中，其主要作用的变异来源是基因突变．
（二）富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一．主要是利用不同微生物生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其数量大大增加．如图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物--对羟基苯甲酸的微生物的实验过程．请分析回答下列问题．
（1）①→③重复培养的目的是扩大培养（使分解对羟基苯甲酸微生物的比例增高）．
（2）⑤的菌落中大部分是降解对羟基苯甲酸微生物．设置⑥的目对照作用．
（3）⑤→⑥采用单细胞挑取法，将所选菌种接种到⑥的培养基中，在此操作过程中如何防止杂菌污染（至少写出两点）．接种过程在火焰旁边进行，接种前灼烧接种环，打开试管后试管口在酒精灯上灼烧，培养皿打开时，在酒精灯旁打开一个缝隙等等．

Answer 1

分析 培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．培养基的分类：①按物理性质分，分为液体培养基和固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般是琼脂．②按化学成分分，分为天然培养基和合成培养．两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的．③按用途分，分为选择培养基和鉴别培养基．选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌．

解答 解：（1）欲筛选出能降解原油的菌株，培养基中应只含有原油而无其它碳源，不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存，这类培养基属于选择培养基．
（2）分离纯化菌种时，需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便纯化菌种．
（3）降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈（透明圈）越大．
（4）细菌是原核生物，没有染色体变异和基因重组，其变异来源是基因突变．
（二）（1）经过①②③的重复培养，增大了分解对羟基苯甲酸的微生物的比例．
（2）培养的微生物主要是能降解对羟基苯甲酸的微生物，所以⑤的菌落中大部分是降解对羟基苯甲酸微生物．⑥中没有对羟基苯甲酸，⑦中含有对羟基苯甲酸，所以⑥是对照组，对照的目的是说明通过选择培养的确得到了欲分离的目标微生物．
（3）接种过程在火焰旁边进行，接种前灼烧接种环，打开试管后试管口在酒精灯上灼烧，培养皿打开时，在酒精灯旁打开一个缝隙等等．
故答案为：
（一）（1）原油　选择　
（2）平板划线法　稀释涂布平板法　
（3）分解圈（透明圈）     分解圈越大     强
（4）基因突变
（二）（1）扩大培养（使分解对羟基苯甲酸微生物的比例增高） 
（2）对羟基苯甲酸  对照作用
（3）接种过程在火焰旁边进行，接种前灼烧接种环，打开试管后试管口在酒精灯上灼烧，培养皿打开时，在酒精灯旁打开一个缝隙等等

点评 本题的知识点是微生物培养过程中的无菌技术，分离微生物的常用的接种方法和接种工具，主要考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．