题目内容

20．如图为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上存活）和小鼠骨髓瘤细胞（具分裂能力、不能在HAT培养基上存活）进行人类基因定位的操作示意图，请回答相关问题．
杂交细胞
ABC
人类
染色体		l-++
2+-+
3++-
酶m+-+
n-++
p+-+
q-++
（1）图示方法是动物细胞融合技术的应用，该技术的基础是动物细胞培养技术．
（2）操作所用的成纤维细胞应传代10代以内，诱导融合时需要加入的促融剂是PEG（或灭活病毒）．
（3）人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成多核细胞，再经过一次有丝分裂，形成单核细胞．
（4）HAT培养基起选择培养作用，操作中加入鸟本苷的目的是除去成纤维细胞．细胞培养所需的气体条件是95%空气和5%CO2，其中CO2的主要目的是维持培养液的pH；除以上两类条件外，动物细胞体外培养还需要营养和无菌无毒的环境两项条件．
（5）上表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4 种酶（“+”表示存在，“-”表示不存在），这4种酶均为单基因编码产生，据表判断，编码m和p酶的基因位于染色体2上，排列方式呈线性．

分析 1、据图分析，成纤维细胞和小鼠骨髓瘤细胞在促融剂的作用下形成三种杂交细胞，即成纤维细胞自身融合细胞、小鼠骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交细胞；在HAT培养基上筛选出成纤维细胞自身融合细胞和杂交细胞；加人鸟本苷的目的是除去成纤维细胞，留下杂交细胞．
2、杂交细胞A中存在2和3号染色体，表达出酶m和p；杂交细胞B存在1和2号染色体，表达出酶n和q；说明编码m和p酶的基因位于染色体2上．

解答 解：（1）据图分析，该技术属于动物细胞融合技术，基础是动物细胞培养．
（2）目前使用的正常细胞通常为10代以内的，可以保持细胞正常的二倍体核型．成纤维细胞应传代10代以内，遗传物质没有发生改变的细胞株，诱导融合时需要加入的促融剂是PEG（或灭活病毒）．
（3）人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成多核细胞，经过一次有丝分裂，形成单核细胞．
（4）据题干信息，人成纤维细胞能在HAT培养基上存活，而小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上存活，则HAT培养基起选择培养作用，筛选出人成纤维细胞和成纤维细胞融合的杂交细胞，操作中加人鸟本苷的目的是除去成纤维细胞，筛选出杂交细胞；动物细胞培养所需的气体条件是95%空气和5%CO2，其中CO2的主要目的是维持培养液的pH；除以上两类条件外，动物细胞体外培养还需要充足的营养和无菌无毒的环境条件．
（5）据表判断，杂交细胞B中不存在2号染色体，酶m和p没有表达，说明编码m和p酶的基因位于染色体2上，排列方式呈线性．
故答案为：
（1）动物细胞融合     动物细胞培养    
（2）10    PEG（或灭活病毒）
（3）有丝分裂
（4）选择      除去成纤维细胞     维持培养液的pH   营养   无菌无毒的环境
（5）m和p        线性

点评 本题考查动物细胞融合、动物细胞培养、基因在染色体上等相关知识，意在考查学生运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论．

练习册系列答案
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种群甲乙丙丁戊
能（102kJ/m2）750200.98500
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A．2项B．3项C．4项D．5项

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