Question

11．如图表示质粒和目的基因的部分限制酶的识别位点，表格中是相应限制酶的识别序列，请根据基因工程的知识回答下列问题：

（1）如果利用图甲的质粒和目的基因完成转基因操作，应选用BamHⅠ和SmaⅠ切割目的基因，再选用BdⅠ和SmaⅠ切割质粒；
（2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，若要使该重组质粒得以表达，则该重组质粒中还需要有启动子、终止子等结构；
（3）如果质粒只有如图甲所示的4种限制酶的识别位点，参考表乙的识别序列可知，对于重组质粒而言，还存在3种限制酶的识别位点，将该重组质粒导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法．

Answer 1

分析 分析题图：含有目的基因的外源DNA分子中含有三种限制酶（SmaⅠ、EcoRⅠ和BamHⅠ）的识别和切割位点，其中EcoRⅠ位于目的基因中．质粒含有4种限制酶的识别位点．
分析表格：BdⅠ与BamHⅠ识别的序列不同，但两者切割产生的黏性末端相同．

解答 解：（1）含有目的基因的外源DNA分子中含有三种限制酶的识别和切割位点，其中EcoRⅠ位于目的基因中，不能用该酶切割，因此应选用BamHⅠ和SmaⅠ切割目的基因；应该用同种限制酶切割质粒，但质粒中不含BamHⅠ切割位点，由表格可知BdⅠ与BamHⅠ切割产生的黏性末端相同，因此再选用BdⅠ和SmaⅠ切割质粒．
（2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；若要使该重组质粒得以表达，则该重组质粒中还需要有启动子和终止子等结构．
（3）如果质粒只有如图甲所示的4种限制酶的识别位点，参考表乙的识别序列可知，BdⅠ与BamHⅠ切割产生的黏性末端相同，再DNA连接酶的作用下可连接起来，但连接后既不能被BdⅠ切割，也不能被BamHⅠ切割，因此对于重组质粒而言，还存在3种限制酶（SmaⅠ、EcoRⅠ和HpaⅠ）的识别位点；将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法．
故答案为：
（1）BamHⅠSmaⅠBdⅠSmaⅠ
（2）基因表达载体的构建       启动子、终止子
（3）3     农杆菌转化法

点评 本题结合图表，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题；识记基因工程的操作工具及其功能，能结合图中和表中信息准确答题，属于考纲理解层次的考查．