题目内容
11．某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：（1）分离纯化乳酸菌时，首先箝要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释．梯度稀释的目的是泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接分离很难分离到单个菌落（为了聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落）．
（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用除了可以中和产生的乳酸以外，还可以鉴别乳酸菌．分离纯化时应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌．
（3）若该同学采用稀释涂布平板法来检测泡菜滤液中乳酸菌的含量，先将lmL泡菜滤液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．lmL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每毫升滤液中的活菌数为3.8×104个．
（4）若对筛选得到的乳酸菌进一步纯化，宜采用的纯化方法是平板划线法．乳酸菌在20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油．
分析 1、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求起平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数．
2、泡菜发酵的实验原理：
（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸．
（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化．
温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加．一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降．
（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量．
解答 解：（1）分离纯化乳酸菌时，首先要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释．泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接分离很难分离到单个菌落，因此需要对泡菜滤液进行梯度稀释．
（2）在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离；分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌．
（3）若该同学采用稀释涂布平板法来检测泡菜滤液中乳酸菌的含量，先将lmL泡菜滤液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．lmL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每毫升滤液中的活菌数为=（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×104个．
（4）若对筛选得到的乳酸菌进一步纯化，宜采用的纯化方法是平板划线法．乳酸菌在20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油．
故答案为：
（1）泡菜滤液中乳酸菌的浓度高，直接分离很难分离到单个菌落（为了聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落）
（2）鉴别乳酸菌 具有透明圈
（3）3.8×104
（4）平板划线法 甘油
点评 本题考查微生物的分离与培养以及泡菜制作的相关知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验选用的材料、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．
| 枯草杆菌 | 核糖体S12蛋白第55-58位的氨基酸序列 | 链霉素与核糖体的结合 | 在含链霉素培养基中的存活率（%） |
| 野生型 | …P-K-K-P… | 能 | 0 |
| 突变型 | …P-R-K-P… | 不能 | 100 |
| A． | 链霉素通过与核糖体结合抑制其转录功能 | |
| B． | 链霉素可以诱发枯草杆菌产生相应的抗性突变 | |
| C． | 突变型的产生是由于碱基对的缺失或增加所致 | |
| D． | S12蛋白结构改变使突变型具有链霉素抗性 |
| A． | 搅拌的目的是让上清液中析出重量较轻的T2噬菌体颗粒 | |
| B． | 被35S标记的噬菌体是通过将其接种在含有35S的培养基中培养而获得的 | |
| C． | 若混合保温时间偏短，且其他操作正常，对上清液放射性没有明显的影响 | |
| D． | 该实验证明了噬菌体的遗传物质是DNA而不是蛋白质 |
| A． | 动物细胞培养所需CO2气体的主要作用是维持培养液的pH | |
| B． | 癌细胞在培养瓶中培养不会出现接触抑制的现象 | |
| C． | 动物细胞培养的培养液中一定要添加血清、血浆等天然成分 | |
| D． | 用于核移植的供体细胞一般都选用传代培养10代以内的细胞 |
| A． | 果酒制作过程中，葡萄汁装人发酵瓶时，要留有大约1/3的空间 | |
| B． | 腐乳的制作中，封瓶时最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染 | |
| C． | 在多种微生物的协同作用下，豆腐转变成美味的腐乳，起作用的酶只有蛋白酶 | |
| D． | 果酒制作装置中排气口连接一个长而弯曲的胶管的目的是防止空气中微生物 的污染 |
| A． | 利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株 | |
| B． | 利用花药离体培养得到单倍体植株 | |
| C． | 人工种子的培育 | |
| D． | 利用细胞工程培育脱毒马铃薯苗 |
| A． | 干旱环境中的植物为了适应环境而产生抗旱性变异 | |
| B． | 基因突变的频率较低、不能为生物进化进提供大量的原材料 | |
| C． | 进化不一定会产生新物种，但新物种的产生都是进化的结果 | |
| D． | 基因库是指一个种群中全部个体所含有的全部等位基因 |
