Question

2011年11月，武汉大学利用细菌将人的血清白蛋白基因导入水稻体内，借助水稻合成了人的血清白蛋白，这种蛋白质和人体自然产生的这类物质是完全一致的．结合图示回答转基因水稻培育过程的相关问题．

（l）限制酶Mun I和限制酶EcoR I的识别序列及切割位点分别是-C↓AATTG-和-G↓AATTC--．为保证重组质粒表达载体的准确构建，应该用限制酶

 

切割质粒，用限制酶

 

切割含目的基因的DNA分子，用DNA连接酶连接目的基因和质粒．基因表达载体的组成除目的基因和标记基因外，还包括

 

．
（2）将重组DNA分子导入植物受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和

 

法．农杆菌的Ti质粒上的

 

可转移到受体细胞，并且整合到受体细胞的

 

上．
（3）为了确定转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的

 

做探针进行分子杂交检测，又要从个体水平鉴定水稻植株是否含有人的血清白蛋白．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析题图：图示为转基因水稻培育过程图，其中①为基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；②表示将基因表达载体导入受体细胞；③表示采用植物组织培养技术将水稻细胞培养成转基因水稻．

解答： 解：（1）由图可知，目的基因两侧都是限制酶EcoRⅠ的切割位点，因此应选用限制酶EcoRⅠ切割含有目的基因的外源DNA分子；基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子和终止子．
（2）将重组DNA分子导入植物受体细胞的常用方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法．农杆菌的Ti质粒上的T-DNA可转移到受体细胞，并且整合到受体细胞的染色体的DNA上．
（3）基因工程的最后步骤是目的基因的检测与鉴定，为了确定转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的人血清白蛋白基因做探针进行分子杂交检测，又要从个体水平鉴定水稻植株是否含有人的血清白蛋白．
故答案为：
（1）MunⅠEcoRⅠ启动子、终止子
（2）基因枪法（花粉管通道法）     T-DNA     染色体的DNA
（3）人血清白蛋白基因

点评：本题结合转基因水稻的培育过程图，考查基因工程的工具和操作步骤等相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤及应用，能准确判断图中各过程的名称，并能根据图中信息选择合理的限制酶；识记目的基因导入植物受体细胞的方法等．