Question

12．组织型纤溶酶原激活剂（tPA）在人体纤溶和凝血的平衡凋节中发挥着关键性的作用，科研人员现在能利用转基因奶牛的乳汁生产组织型纤溶酶原激活剂（tPA）．回答下列相关问题：
（1）为了获得更多的tPA基因，可对其进行体外“克隆”，该技术指的是PCR技术．
（2）在构建的基因表达载体中，应将tPA基因首端与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件结合．将目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法．
（3）在培育转基因奶牛的过程中，应取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定，选用雌性胚胎，通过胚胎移植技术，将早期胚胎移入代孕母牛的子宫内．从个体水平上看，若转基因牛的乳汁中产生组织型纤溶酶原激活剂，则可确定转基因牛培育成功．
（4）若从囊胚的内细胞团可分离出ES细胞，培养ES细胞时，培养液中加入分化诱导因子，可以分化为不同类型的细胞．

Answer 1

分析 1、PCR技术：
（1）PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
（2）PCR的原理是DNA复制，需要的条件包括：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
（3）PCR扩增DNA的过程包括：高温变性、低温复性、中温延伸过程．
2、“乳腺生物反应器”的优点是：
（1）动物的基因组成和人类相似，从人类染色体上切下来的任何基因都可以直接转移到动物体内．
（2）动物乳腺细胞可以是任何基因正确表达，并正确进行后加工．
（3）用动物乳腺生产外源蛋白质产量很高．用动物乳腺生产药品不需要产品提纯，不需要复杂设备，动物吃的是草，生产的是奶，奶中含有珍贵的蛋白质，因此，“乳腺生物反应器”是人们公认的、最理想的生物反应器．

解答 解：（1）基因工程中，在体外扩增目的基因常利用PCR技术．
（2）要利用奶牛乳汁生产组织型纤溶酶原激活剂（tPA），在构建的基因表达载体中，应将tPA基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件结合，使目的基因在乳腺组织中特异性表达．将目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法．
（3）在培育转基因奶牛的过程中，奶牛必须是雌性的，应取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定，选用雌性胚胎，通过胚胎移植技术，将早期胚胎移入代孕母牛的子宫内．从个体水平上看，若转基因牛的乳汁中产生组织型纤溶酶原激活剂，则可确定转基因牛培育成功．
（4）若从囊胚的内细胞团可分离出ES细胞，培养ES细胞时，培养液中加入分化诱导因子，可以分化为不同类型的细胞．
故答案为：
（1）PCR
（2）乳腺蛋白    显微注射法
（3）性别    胚胎移植    转基因牛的乳汁中产生组织型纤溶酶原激活剂
（4）分化诱导因子

点评 本题综合考查基因工程、动物体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等技术，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记动物细胞核移植和动物细胞培养的原理；识记胚胎移植的生理学基础及基本程序，能准确判断图中各过程的名称，再结合所学的知识答题．