Question

10．下表是筛选异养型细菌的培养基配方．

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
FeCl3	0.1g
X	1g
维生素	微量
琼脂	15g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL

（1）苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供碳源和氮源（写全得分），该培养基从作用看属于选择培养基．制备固体培养基时调节PH在
溶化步骤后；对培养基进行灭菌的常用是方法高压蒸汽灭菌法．
（2）图1是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图．则获得图B效果的接种方法是平板划线法．运用A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目低．在探究“酵母菌种群数量变化”实验已知每个计数室由25×16=400个小格组成，容纳液体的总体积为0.4mm³，观察到图2中该计数室所示a、b、c、d、e  5个中格共有蓝藻80个，则1ml样液中约有蓝藻10⁶个．
（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加酚红指示剂可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原理用方程式表示为CO（NH₂）₂+H₂O-^脲酶-→CO₂+2NH₃．

Answer 1

分析 据图表分析：1、图A的接种方法是稀释涂布平板法，图B的接种方法是平板划线法．
2、表中所给的培养基配方是细菌的固体培养基配方，表中已知成分中缺少碳源和氮源，必须由X物质提供．
3、微生物培养基制作完成后，应该先调整pH，再灭菌，对培养基的灭菌常用高压蒸汽灭菌法．常用的在固体培养基上的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法．尿素分解菌可以用酚红指示剂检测．

解答 解：（1）根据培养基的配方可以看出，所给的物质中不能为微生物提供碳源和氮源，因此微生物生长所需要的碳源和氮源，可以由X提供．该培养基从作用看属于选择培养基，在制备固体培养基时一般要先溶化再调节PH值，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法．
（2）B图为平板划线法；运用A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目低，因为一个菌落可能是由一个或多个细菌繁殖形成．5个中格共有蓝藻80个，则25个中格有400个蓝藻，25个中格的体积是0.4mm³，所以1ml样液中约有蓝藻400÷0.4×1000=10⁶个．
（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加酚红指示剂可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原因是尿素被细菌合成的脲酶分解产生氨，而氨能使酚红指示剂变红；原理用方程式表示为CO（NH₂）₂+H₂O-^脲酶-→CO₂+2NH₃．
故答案为：
（1）碳源和氮源       选择        溶化      高压蒸汽灭菌法
（2）平板划线法       低          10⁶
（3）酚红指示剂        CO（NH₂）₂+H₂O-^脲酶-→CO₂+2NH₃

点评 本题主要考查微生物的营养物质、平板计数法和尿素分解菌的筛选鉴定等内容，意在加强学生对相关知识点的识记与理解．