Question

8．为了使目的基因可以在受体细胞内表达，需要选择合适的表达载体与目的基因连接．如图为某种表达质粒的示意图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，供目的基因连接插入，amp^R为青霉素抗性基因，tet^R为四环素抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点．下列说法正确的是（　　）

• A． 正确插入目的基因后，表达载体上四环素抗性基因序列将不能转录，因而丧失活性
• B． 为了有效进行连接，含目的基因的DNA片段两侧也应具有EcoRI或BamHI酶切位点
• C． 正确连接形成的重组表达质粒导入受体细胞后，受体细胞可以具有四环素和青霉素的抗性
• D． 因为表达质粒的启动子后是四环素抗性基因，所以需要目的基因序列中含有独立的启动子才能正常表达

Answer 1

分析 基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．

解答 解：A、正确插入目的基因后，表达载体上四环素抗性基因序列将不能转录，但表达载体仍有活性，A错误；
B、限制酶能识别特定的核苷酸序列，所以为了有效进行连接，含目的基因的DNA片段两侧也应具有EcoRI或BamHI酶切位点，B正确；
C、正确连接形成的重组表达质粒导入受体细胞后，由于四环素抗性基因序列被破坏，所以受体细胞只具有青霉素的抗性，不具有四环素的抗性，C错误；
D、表达质粒的启动子同样能使目的基因序列正常表达，D错误．
故选：B．

点评 本题考查基因表达载体的构建，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点的能力；能运用所学知识作出准确的判断和得出正确的结论．