Question

19．如图为基因工程中利用农杆菌转化法，培育出新性状植株的过程，请据图分析回答：

（1）将携带外源基因的DNA导入植物细胞中所用到的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶．
（2）农杆菌在自然状态下，能感染双子叶植物和裸子植物，因为这些植物受到损伤时，伤口会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞．利用农杆菌转化法时，作为基因工程中运载体的是Ti质粒．
（3）目的基因导入植物细胞后，能够在受体细胞中维持稳定和表达的过程，称为转化．检测目的基因是否转录出了mRNA，常用的方法是分子杂交技术．
（4）导入目的基因的植物细胞一般需要通过植物组织培养的方法，才能培育成表现新性状的植株．利用基因工程进行育种，可以培育出具有新性状的植株，这种育种方式的优点是：①能打破生物种属的界限；②在分子水平上定向改变生物的遗传特性．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）将携带外源基因的DNA导入植物细胞之前，首先要构建基因表达载体，该步骤需要限制酶和DNA连接酶．
（2）农杆菌在自然状态下，能感染双子叶植物和裸子植物，因为这些植物受到损伤时，伤口会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞．利用农杆菌转化法时，作为基因工程中运载体的是Ti质粒，Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．
（3）目的基因导入植物细胞后，能够在受体细胞中维持稳定和表达的过程，称为转化．检测目的基因是否转录出了mRNA，常用分子杂交技术．
（4）将转基因细胞培育成转基因植株需要采用植物组织培养技术；利用基因工程进行育种，可以培育出具有新性状的植株，这种育种方式的优点是：①能打破生物种属的界限；②在分子水平上定向改变生物的遗传特性．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶和DNA连接酶      
（2）双子叶   酚类化合物  Ti质粒
（3）转化     分子杂交技术
（4）植物组织培养
①能打破生物种属的界限
②在分子水平上定向改变生物的遗传特性

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息答题，属于考纲识记和理解层次的考查．