Question

回答基因工程中的有关问题：
Ⅰ．限制酶是基因工程中的重要工具酶，下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图甲、图乙中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

（1）一个图甲所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有      _______个游离的磷酸基团？
（2）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止        。
Ⅱ．原核生物（如大肠杆菌）是基因工程中较理想的受体细胞，它们具有一些其他生物没有的特点：①繁殖快②多为单细胞③______________等优点．大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用_________处理细胞，使之成为_________­­___细胞，然后完成转化．
Ⅲ．植物基因工程中将目的基因导入受体细胞最常用的方法是__________,且一般将目的基因插入Ｔi质粒的____________中形成重组Ｔi质粒，这样可将目的基因整合到受体细胞的染色体上，科学家发现：这样得到的转基因植株，其目的基因的传递符合孟德尔遗传规律，则该转基因植株一般为杂合子。若要避免基因污染，一般需将目的基因导入植物细胞的__________DNA中。

Answer 1

（除标注外，每空2分，共15分）
Ⅰ（1）0  2 （2）质粒和含目的基因的外源DNA片断自身环化
Ⅱ　遗传物质相对较少  Ca²⁺ （1分）　感受态  Ⅲ．农杆菌转化法  T-DNA   细胞质（线粒体、叶绿体）

解析试题分析：I（1）图中质粒有一个Sma Ⅰ切割位点，切割前因为是环状没有游离的磷酸基团，切割后成为链状DNA，有2个游离的磷酸基团。
（2）两种限制酶切，因为碱基互补配对原则可以防止单酶切后的质粒和目的基因的外源DNA片段自身环化现象。
II(1)原核生物遗传物质相对较少，大肠杆菌首先要用钙离子处理使其成为感受态细胞。
III植物导入方法最常用的是农杆菌转化法，主要是Ti质粒中的T-DNA中形成重组质粒可以整合到植物受体细胞的染色体上，如果要避免基因污染应将其导入到细胞质基因中，因为细胞质基因不会随花粉进行传播。
考点：本题考查基因工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。