题目内容

14．环境雌激素（EEs）影响动物和人类的性腺发育．斑马鱼在EEs的诱导下，会表达出卵黄蛋白原（vtg）．已知绿色荧光蛋白（GFP）基因能使斑马鱼发光，欲获得能检测水中是否含有EEs的转基因斑马鱼，下列操作合理的是（　　）
A．将EEs基因的启动子与GFP基因重组B．将vtg基因的启动子与GFP基因重组
C．将GFP基因的启动子与GFP基因重组D．将GFP基因的启动子与vtg基因重组

分析 基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；
（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；
（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选．

解答 解：EEs能诱导斑马鱼表达出卵黄蛋白原（vtg），因此可通过检测斑马鱼中是否表达出卵黄蛋白原（vtg）来检测水中是否含有EEs，则vtg基因为目的基因；绿色荧光蛋白（GFP）基因能使斑马鱼发光，为标记基因．基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、标记基因和终止子等，因此，欲获得能检测水中是否含有EEs的转基因斑马鱼，需要将vtg基因的启动子与GFP基因重组．
故选：B．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合题中信息做出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查．

练习册系列答案
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7．图示为稀释涂布平板法的操作流程．请回答下列问题：

（1）图示流程的主要操作包括梯度稀释和涂布平板．
（2）一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，结果比较准确．
（3）要证明培养基中纤维素有选择作用，可以用用牛肉膏蛋白胨培养基作对照，比较菌落目：还可以在培养基中加入刚果红染料，如果所有菌落周围均出现明显的透明圈，也证明其选择作用．

如图表示细胞膜的亚显微结构，下列叙述错误的是（ ）

A．细胞膜的基本骨架是②

B．细胞膜的功能复杂程度主要与①有关

C．②是静止的，但①是运动的，所以细胞膜具有流动性

D．CO2、H2O通过细胞膜的方式相同
2．科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图所示（成纤维细胞可增殖）．下列叙述错误的是（　　）
A．过程②常用的方法是显微注射法
B．代孕母羊要注射免疫抑制剂防止发生免疫排斥反应使移植胚胎死亡
C．卵母细胞去核的目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞
D．整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养从而获得大量的细胞群
9．如图表示细胞工程的流程图（a、b表示过程），请据图回答下列问题：
（1）若图示为动物细胞融合的过程，则a特有的诱导剂是灭活的病毒．以动物细胞融合为基础发展起来的杂交瘤技术为制造单克隆抗体开辟了新途径，通过把能产生抗体的B淋巴（浆）细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合，得到既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体的杂交瘤细胞．
（2）若图示为植物体细胞杂交过程，则在甲、乙融合之前，需要用纤维素酶和果胶酶（填工具酶）制备原生质体．这项工程的意义是克服有性杂交远缘不亲合障碍，扩大亲本组合的范围．
（3）由甲乙融合得到丙细胞的基本原理是细胞膜的流动性．
19．近年来市民中流行自酿葡萄酒，但自酿葡萄酒时培养瓶发生爆炸的新闻时有报道．回答下列问题：
（1）自酿葡萄酒用的培养瓶爆炸，原因可能是发酵过程中产生的二氧化碳过多，导致内部压强过大所致．为避免这种危险的发生，应采取的措施是定期拧松瓶盖．
（2）在分离和培养酵母菌时，需要进行无菌操作，对耐高温、需要保持干燥的培养皿和金属用具，宜采用高压蒸汽灭菌．将得到的菌株接种到液体培养基中混匀后，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现振荡培养的细菌生长速度更快，究其原因，振荡培养能提高培养液中溶解氧（氧气）的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率．
（3）在酸性条件下，可用重铬酸钾来检测发酵产物中是否有酒精产生．若要检测所得果酒中活体酵母菌的密度，一般采用稀释涂布平板法，但此种方法最终计算得出的菌体数目往往比实际菌体数目少，原因是两个或多个细胞相连时，会被统计成一个菌落．
6．赫尔希和蔡斯分别用35S和32P标记T2噬菌体的蛋白质和DNA，下列被标记的部位组合正确的是（　　）
A．①②B．①③C．①④D．②④
3．回答下列有关基因工程的问题
从人的胰岛细胞中制备胰岛素编码基因，再用DNA连接酶与合适的质粒拼接成重组质粒．将重组质粒导入酵母菌中便可实现重组人胰岛素的工业化生产，用于治疗糖尿病．

（1）本实验操作中，所选用的受体细胞是酵母菌．
（2）若人胰岛素编码基因是使用限制酶PstI（识别序列和切割位点如图1所示）切开的，那么如图2所示的质粒应使用限制酶NsiI切开，才能保证人胰岛素编码基因与质粒直接粘连拼接．
（3）如果人胰岛素编码基因和质粒的大小分别为0.5kb和3.2kb（1kb=1000对碱基），那么安装了单个人胰岛素编码基因的重组质粒用限制酶EcoRI和AatII联合酶切后，所产生的DNA片段大小应为1.4kb和2.3kb．
（4）将上述人胰岛素编码基因与质粒的连接产物和受体细胞混合进行导入操作，之后还需要筛选，这是因为B、D．（可多选）
A．人胰岛素基因和质粒连接形成重组质粒
B．导入成功的概率很低，大部分酵母菌没有导入任何质粒
C．人胰岛素基因自我连接
D．连接之后可能产生空质粒，导入后产生含有空质粒的酵母菌．
4．遗传图解可以很好的表示杂交实验的过程，对其表述不准确的是（　　）
A．P 表示亲本，子二代表示为 F2B．⊕表示自交
C．杂交时亲本都可能是显性个体D．性状分离时会出现隐性性状

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