Question

14．已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病．SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体．某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作．其简要的操作流程如下：

（1）实验步骤①所代表的反应过程是逆转录．
（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和DNA连接酶，后者的作用是将限制性内切酶切割的目的基因和载体连接起来．
（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能复制，也不能以其为模板合成S基因的mRNA（或转录）．
（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用大肠杆菌中表达的S蛋白与SARS康复病人血清进行抗原--抗体特异性反应实验，从而得出结论．
（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表达蛋白质所用的基因相同．

Answer 1

分析 根据逆转录的概念分析（1）．根据限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用分析（2）．根据S基因在大肠杆菌中不能进行复制，也不能转录分析（3）．根据抗原一抗体特异性反应分析（4）．根据基因控制蛋白质的合成分析（5）．

解答 解：（1）实验步骤①RNA控制DNA合成，该过程是逆转录．
（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B，必须使用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，形成相同的粘性末端，再用DNA连接酶，形成重组DNA．
（3）如果省略步骤③基因表达载体的构建，而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能进行复制，也不能进行以其为模板合成S基因的mRNA（或转录）．
（4）步骤④检测所表达的S蛋白的特征，可用大肠杆菌中表达的S蛋白与SARS康复病人血清进行抗原-抗体特异性反应实验，如果能够特异性的结合，说明表达成功．
（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表达蛋白质所用的目的基因相同．
故答案为：
（1）逆转录　
（2）目的基因          载体
（3）复制　以其为模板合成S基因的mRNA（或转录）
（4）SARS康复病人血清　
（5）表达蛋白质所用的基因相同

点评 本题考查基因工程的步骤等相关知识，意在考查学生获取处理信息的能力，分析和解决问题的能力，有一定的综合性．