Question

17．某生物兴趣小组同学为探究牛的瘤胃中是否含有分解尿素的细菌，设计了以下实验．据图分析回答微生物的利用相关知识：
（1）从营养物质的组成分析，图中所用培养基共有的特点是以尿素为唯一氮源．
（2）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，这种方法的主要目的是使聚集的接种物分散．
（3）为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24～48h，观察并统计尿素分解菌的菌落数，结果如表，其中10⁶或10⁵倍的稀释比较合适．

稀释倍数	103	104	105	106	107
菌落数	＞500	367	248	36	18

从设计实验的角度看，培养箱中还如何设置一组对照实验一组不接种的空白培养基，此对照实验的目的是培养基制备是否被杂菌污染．
（4）鉴定尿素分解菌菌落原理是，微生物产生的脲酶能将尿素分解成氨，使培养基的pH升高，使指示剂变红．实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是防止造成环境污染．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长．
3、消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

解答 解：（1）要筛选能分解尿素的细菌，应该用以尿素为唯一氮源的培养基培养．
（2）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，这种方法的主要目的是使聚集的接种物分散开来，获得比较纯净的菌株．
（3）观察并统计菌落数应选30-300之间的培养皿进行统计，故应选10⁶或10⁵倍的稀释比较合适．实验设计过程应遵循对照原则，该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染．
（4）可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH升高，使指示剂变为红色．实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，避免细菌污染环境和感染操作者．
故答案为：
（1）尿素
（2）分散
（3）10⁶或10⁵ 一组不接种的空白培养基     培养基制备是否被杂菌污染
（4）脲酶      防止造成环境污染

点评 本题是对用于微生物培养的培养基的配方及营养成分、选择培养基的选择作用、常用的接种方法、无菌操作技术、对分解尿素的菌的鉴定等相关知识的综合性考查，回忆微生物培养的培养基的配方和营养成分、选择培养基的选择作、常用的接种方法的具体操作和目的，无菌操作技术、对分解尿素的菌的鉴然后结合问题进行解答．