Question

6．从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．
（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．培养噬盐菌的菌样应从海滩等高盐环境采集．
（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养．
（3）接种前要对培养基进行高压蒸汽灭菌处理．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．
（4）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法．

获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法，图B效果的接种方法是平板划线法．一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高，应当怎样操作？
（5）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是温度，应该保持纤维素的量与浓度、反应时间、pH等不变（至少答两项）．

Answer 1

分析 筛选目的菌株一般是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法．培养基的配制时，各种成分在溶化后分装前必须进行pH调整，接种前要进行灭菌，保证无菌操作，培养微生物时，应将培养皿倒置．

解答 解：（1）噬盐菌的菌样应从高盐环境采集，如高盐海滩等．
（2）目的微生物能够产生淀粉酶说明其碳源是淀粉，筛选菌株时应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养．
（3）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行?
（4）据图分析，A培养皿中的菌落均匀属于稀释涂布平板法接种，B培养皿中的菌落分为5个区域，属于平板划线法接种．题干中的同学的操作结果的原因是菌液浓度过高（或培养过程被杂菌污染），所以应该增大稀释倍数（或严格无菌操作，原因与操作要对应）．
（5）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是温度，而无关变量应保持相同且适宜，因此应该保持纤维素的量与浓度、反应时间、pH等不变．
故答案为：
（1）海滩等高盐   
（2）以淀粉为惟一碳源   高温
（3）高压蒸汽灭菌   无菌
（4）稀释涂布平板法   平板划线法   菌液浓度过高    增大稀释倍数（或培养过程被杂菌污染   严格无菌操作；或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌   每划一个新区域前都要对接种环进行灭菌处理）（原因与操作要对应）
（5）温度   纤维素的量与浓度、反应时间、pH

点评 微生物的分离要根据微生物不同的嗜好，配制不同的培养基，有的根据营养物质的特殊的需求，比如尿素分解菌是氮源是尿素，纤维素分解菌的碳源是纤维素；有的根据环境的要求，比如葡萄球菌能够耐高浓度的盐溶液，可以在培养基中加入高浓度的氯化钠等，在复习的过程中注意总结．