Question

6．请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（l）在动物细胞培养中，通常在合成培养基中加入一定量的抗生素，其目的是防止细菌污染．
（2）在使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成份，作用是补充培养基中缺乏的物质．
（3）在动物细胞培养时，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制，因此要定期用胰蛋白酶处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬浮液，否则，贴壁细胞分裂生长到相互接触时，细胞会停止分裂增殖．
（4）在细胞培养过程中，通常在冷冻（或超低温、液氮）条件下保存细胞．
（5）若在营养全面的动物细胞培养液中不慎混入了一种细菌，结果所培养的细胞全部死亡．从科学严谨性的角度考虑，能不能直接认为这些细胞的死亡就是该种细菌作用而导致的？不能，理由是也可能是环境中其他因素或操作错误或取材不当导致了细胞的死亡．

Answer 1

分析 1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．
3、培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素．；无毒--定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害．
（2）营养：
成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分．
培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4．
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO₂的混合气体的培养箱中进行培养．O₂：是细胞代谢所必需的  CO₂主要作用是维持培养液的pH．

解答 解：（1）通常在动物细胞培养液中加一定量的抗生素，以防止培养过程中的污染．
（2）在动物细胞体外培养过程中，在使用合成培养基时通常需加入血清、血浆等天然成分，补充培养基中缺乏的物质．
（3）在动物细胞培养时，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制，因此要定期用胰蛋白酶处理细胞，分散细胞，使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬浮液．
（4）若保存细胞，通常在液氮（或冷冻）条件下，因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞代谢速率降低．
（5）从科学严谨性的角度考虑，这些细胞的死亡可能是该种细菌作用，也可能是环境中其他因素或操作错误或取材不当，导致了细胞的死亡．
故答案为：
（1）防止细菌污染 
（2）补充培养基中缺乏的物质
（3）接触抑制        胰蛋白酶 
（4）冷冻（或超低温、液氮）
（5）不能     也可能是环境中其他因素或操作错误或取材不当导致了细胞的死亡

点评 本题考查动物细胞培养的过程和原理等，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络的能力；能运用所学知识，准确判断生物学问题的能力．