题目内容
在动物细胞培养过程中，通过一系列技术方法，就能测得一个细胞周期以及周期中各个时期所需的时间。下图一表示一个细胞周期，其中分裂间期包含G1、S、G2三个阶段（其中G1期主要合成RNA与DNA复制相关的酶，G2期主要合成另一些RNA和分裂期相关的酶，设G1期细胞核中的DNA含量为2c）图二表示动物细胞培养过程。
请据图作答：
（1）用图一中字母的先后顺序表示一个完整的细胞周期 。
（2）制作动物细胞悬浮液，应先剪碎组织，再用 使细胞分开。在图二的细胞培养中（培养条件正常），在何种情况下细胞就会停止分裂增殖？答： 。
（3）相对正常的细胞培养，若用DNA合成抑制剂处理所培养的细胞，DNA含量为 c的细胞比例会增加；若用秋水仙素处理，则DNA含量为 c的细胞比例会增加。
（4）图二中的器皿轻加振荡，分裂期细胞就会脱离器皿壁而悬浮于培养液中，从而收集到分裂期细胞。某实验小组通过一定的方法，测得下列数据：对器皿轻加震荡后，获得悬浮于培养液中的细胞1千个；另获得贴壁生长的细胞数为9千个，其中DNA含量为2c的细胞数为6千个，DNA含量为4c的细胞数为2千个。已知该细胞分裂一个周期（T）为10h，细胞周期中各时期所需时间的计算公式为t=T*n/N(n为各时期的细胞数，N为所获得的细胞总数)，则G2期所需的时间约为 h。
（1）G1→S→G2→M
（2）胰蛋白酶 细胞相互接触（或细胞接触产生接触抑制）
（3）2 4
（4）2
适宜的营养、适宜的温度和pH、气体环境等；早期胚胎发育在_＿＿＿＿＿阶段以前的细胞是全能细胞。(6分)下图是动物细胞工程过程中相关的技术操作过程，请据图回答下列问题：
(1) 在操作一中，为了使细胞彼此分离，通常是先用剪刀剪碎组织，再用消化法将细胞分开，消化法用的消化酶是胰蛋白质酶，或胶原酶。研究表明胶原蛋白酶和胰蛋白酶在消化时的机制有差异，下表为两种酶活性的比较表。
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项目 |
胰蛋白酶 |
胶原酶 |
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消化特性 |
适用于消化软组织 |
适用于消化纤维多的组织 |
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用量 |
0.01%～0.5% |
0.1～0.3 mg/ml |
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消化时间 |
0.5～2小时 |
1～12小时 |
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pH |
8～9 |
6.5～7.0 |
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作用强度 |
强烈 |
缓和 |
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细胞影响 |
时间过长时有影响 |
时间长时无大影响 |
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动物血清 |
有抑制作用 |
无抑制作用 |
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Ca2＋和Mg2＋ |
有抑制作用 |
无抑制作用 |
据表中信息可知胰蛋白质酶作用时间需限制在0.5～2小时，原因是____________________________________，为了控制胰蛋白酶的消化作用时间，常用消化临界时向溶液中直接加入________即可使酶灭活而终止消化。操作一的原理是__________________。
(2) 动物细胞培养液配制好后，通常还要先抽取少许放入培养瓶中，置于37℃、CO2培养箱中24小时后观察，这样做的目的是__________________________。
(3) 在动物细胞培养过程中通常要对细胞进行计数，计数的细胞数应为活细胞数。某同学在细胞培养的一次测定中，首先振荡摇匀培养液并立即吸细胞悬液少数向一试管中滴入细胞悬液9滴，再滴入台盼蓝(活细胞染液)1滴，混匀。再从试管中取混合液向计数板边缘轻轻滴1～2滴已染色的细胞悬液，使之充满计数板和盖玻片之间间隙，经测定计数室每小格中活细胞数平均为3个，则原每毫升培养液中含有的活细胞数应为________个。
(4) 科研人员研究发现某一种抗原刺激机体后，在鼠体内可发现有多种效应B细胞都可产生针对于该特定抗原的抗体，这些抗体混合在一起即为多克隆抗体。试从抗原结构的角度分析产生该现象的原因是____________________________________。
