Question

【题目】有机磷农药乐果在农业生产中使用广泛，其长期使用会导致土壤中有不同程度的残留。图甲为科研人员从土壤中分离出降解乐果的菌株的流程，图乙为降解乐果的菌株在固体培养基上产生的透明圈，透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物降解能力的大小，请回答相关问题：

（1）制备该选择培养基时，应以_____为唯一碳源，对培养基灭菌常用的方法是_____。

（2）培养基冷凝后应将平板_____，以防冷凝水落入培养基造成污染。图甲所示平板划线接种的操作过程中，对接种环至少需进行_____次灼烧灭菌。

（3）挑取甲过程分离获得的菌种制成稀释液，采用_____法接种在培养基上，培养3～4 d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良降解菌株（如表）。

菌株	透明圈直径（D）单位：mm	菌落直径（d）单位：mm	D/d
①	22.8	15.3	1.5
②	20.7	7.7	2.7
③	8.2	7.5	1.1

根据实验结果可以确定降解乐果能力最强的菌株是_____（填标号）。

（4）使用乐果显色剂采用比色法检测降解后的乐果残留量，应先制作系列浓度梯度的溶液进行显色反应，下表中3号比色管的乐果浓度应为_____。

管号	1	2	3	4	5	6
乐果浓度/（mgL﹣1）	0					1

如果土壤溶液中乐果浓度为50 mgL﹣1，降解后约有21%的残留量，则需要将残留液稀释_____（填标号：①5②10③20）倍后，再进行比色。

Answer 1

【答案】乐果 高压蒸汽灭菌 倒置 6 稀释涂布平板 ② 0.4mg/L ③

【解析】

选择培养基只允许特定的微生物生长，所以甲图中的选择培养基应以乐果为唯一碳源，培养基冷凝后应将平板倒置，以防冷凝水落入培养基造成污染。平板划线法一般多用于菌种的纯化，对混合菌进行分离；稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株，可以计数，可以观察菌落特征。乙图中 D/d越大说明菌株的分解能力越强。

（1）为了从土壤中筛选出只能利用乐果的微生物，制备选择培养基时需加乐果为唯一碳源，对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌。

（2）培养基冷凝后应将平板倒置，以防冷凝水落入培养基造成污染。图甲所示平板划线接种的操作过程中，对接种环至少需进行6次灼烧灭菌。

（3）分离菌种常用的接种方法为稀释涂布平板。分析表格数据可知，菌株②的D/d值最大，说明降解乐果能力最强。

（4）使用乐果显色剂采用比色法检测降解后的乐果残留量，应先制作系列浓度梯度的溶液进行显色反应，1号为0，6号为1，则1~6号比色管的乐果浓度依次为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1 mg/L。如果土壤溶液中乐果浓度为50 mgL﹣1，降解后约有21%的残留量，则需要将残留液稀释20倍后，再进行比色。