题目内容

在PCR扩增前,需要将下列哪些物质加入微量离心管中?(  )
①模板DNA  
②模板RNA  
③DNA解旋酶  
④耐高温的DNA聚合酶
⑤引物  
⑥PCR缓冲液  
⑦脱氧核苷酸贮备液  
⑧核苷酸贮备液.
A、①④⑤⑥⑦
B、①③④⑤⑥⑧
C、②③④⑤⑥⑦
D、①④⑥⑦⑧
考点:PCR技术的基本操作和应用
专题:
分析:PCR技术:
1、概念:PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术.
2、原理:DNA复制.
3、前提条件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物.
4、条件:模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶).
5、过程:①高温变性:DNA解旋过程;②低温复性:引物结合到互补链DNA上;③中温延伸:合成子链.PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶,高温条件下氢键可自动解开.
解答: 解:①②PCR反应需要模板DNA,①正确,②错误;
③PCR反应过程中通过高温变性,不需要DNA解旋酶,③错误;     
④PCR反应需要耐高温的DNA聚合酶催化延伸过程,④正确;
⑤PCR反应需一对引物,⑤正确; 
⑥PCR反应的实质是模拟体内DNA复制,因此需要稳定的缓冲液环境,⑥正确;
⑦⑧PCR反应需要以四种脱氧核苷酸为原料,⑦正确,⑧错误.
故选:A.
点评:本题考查PCR技术的相关知识,要求考生识记PCR技术的概念、条件、原理及过程,能根据题干要求作出准确的判断,属于考纲识记层次的考查.
练习册系列答案
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PCR技术是一种DNA的扩增技术,操作步骤简介如下:
第一步:准备反应式溶液和模块DNA.
A.配制聚合酶链式反应溶液:
配方:按如下比例进行配制:蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、矿物油1(防止聚合酶在冻结时受伤害);dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一种各加5.
B.准备要拷贝的DNA:
提取准备要拷贝的DNA
(如可以用一牙签轻刮口腔内壁,将牙签放入蒸馏水中摇动.加热蒸馏水沸腾,使细胞破碎放出DNA.用离心机离心后,去除蒸馏水中较大的细胞碎片.这时上清液中就有了较纯的DNA.)
第二步:聚合酶链式反应.
①将要拷贝的DNA“B”放入反应液“A”中.
②水浴加热.首先,94℃,使DNA双螺旋解旋,历时1min;然后,56℃,使引物结合到DNA上,历时90s;最后,72℃,用聚合酶使DNA拷贝,历时90s.
③重复步骤②.每重复一次,即完成一次拷贝.
分析回答下列问题:
(1)以上材料可以说明
 

A.DNA的复制必须在活细胞内才能完成
B.DNA能指导蛋白质的合成
C.在合适的条件下,非细胞环境也能进行DNA复制
D.PCR技术是一种无性生殖技术
(2)为什么要加入两种引物.
 
.引物的作用是什么?
 

(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶,取自生长在温泉中的一种细菌,就PCR技术来讲,你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是
 

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