Question

12．人们预防与诊疗传染性疾病经常使用疫苗和抗体，已知禽流感传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，相应疫苗生产和抗体制备的流程之一如图1所示：
（1）过程②代表基因工程操作步骤中的目的基因的获取；基因工程的核心步骤是③（填序号），该过程所需的工具酶有限制酶、DNA连接酶．
（2）过程⑦利用的生物学原理是细胞膜的流动性，获得的X称为杂交瘤细胞．
（3）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白制备疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出核酸序列病毒，与已知病毒进行比较，或用图中的抗A蛋白单克隆抗体进行特异性结合检测．
如图2所示为培育转基因抗虫棉的技术流程．请据图回答：
（4）在培育成功的转基因抗虫棉的传种接代过程中，抗虫基因和标记基因是否遵循基因的自由组合定律．不遵循为什么？抗虫基因和标记基因不是位于细胞核内的两对同源染色体上．
（5）过程②采用最多的方法是农杆菌转化法．在实验室中，检测抗虫基因是否整合到棉花细胞的DNA分子上的方法是DNA分子杂交．
（6）经过③过程形成愈伤组织的细胞分裂方式是有丝分裂．
（7）过程④所表达的两个重要的生理现象是生长和分化．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：
图1为疫苗生产和抗体制备的流程之一，其中①表示逆转录过程；②是获取目的基因（A基因）的过程；③是基因表达载体的构建过程；④是将目的基因导入受体细胞的过程；⑤是从小鼠皮下获取已经免疫的B细胞的过程；⑥表示B细胞的增殖和分化过程；⑦是细胞融合过程；X为杂交瘤细胞；⑧是获得抗A蛋白单克隆抗体．
图2中：①是基因表达载体的构建过程，②是将目的基因导入受体细胞的过程，③是脱分化过程，④是再分化过程．
农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上．

解答 解：（1）基因工程的操作步骤是：目的基因的获取--构建基因表达载体--导入受体细胞--目的基因的检测和表达．过程②代表的是目的基因的获取．基因工程的核心步骤是③构建基因表达载体．构建A基因重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割含有A基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接A基因和运载体形成A基因重组载体．
（2）过程⑦采用动物细胞融合技术，应用的原理是细胞膜的流动性，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得的细胞叫杂交瘤细胞，其具备了骨髓瘤细胞无限增殖的特性和效应B细胞产生抗体的特性，从而制备单克隆抗体．
（3）本题中提示该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原，故而可选用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗；确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒，可以进行核酸序列的比对，也可以利用单克隆抗体具备特异性，利用抗A蛋白的特异性单克隆抗体通过能否特异性结合判断病毒表面是否有A蛋白的存在进一步进行检测是否为目的RNA病毒．
（4）在培育成功的转基因抗虫棉的传种接代过程中，由于抗虫基因和标记基因不是位于细胞核内的两对同源染色体上，所以抗虫基因和标记基因的遗传不遵循基因的自由组合定律．
（5）过程②采用最多的方法是农杆菌转化法．在实验室中，检测抗虫基因是否整合到棉花细胞的DNA分子上的方法是DNA分子杂交．
（6）植物组织培养过程中，经过③过程形成愈伤组织的细胞分裂方式是有丝分裂．
（7）过程④为再分化，所表达的两个重要的生理现象是生长和分化．
故答案为：
（1）目的基因的获取     ③限制酶   DNA连接酶  
（2）细胞膜的流动性    杂交瘤细胞   
（3）A蛋白      核酸序列（或RNA序列）    抗A蛋白单克隆抗体
（4）不遵循        抗虫基因和标记基因不是位于细胞核内的两对同源染色体上
（5）农杆菌转化法     DNA分子杂交
（6）有丝分裂     
（7）生长和分化

点评 本题结合疫苗生产和抗体制备的流程图，考查基因工程、动物细胞融合技术、单克隆抗体等知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，识记单克隆抗体的制备过程，能准确判断图中各过程的名称，再结合所学的知识答题．