Question

【题目】转基因抗虫棉是人们应用较早的基因重组技术推广项目，目前转基因技术有了新的改进，如下图所示，请根据所学知识回答：

(1)图中转基因过程通常选择的限制酶是_______________，基因工程所用DNA连接酶有两类，其中只能连接黏性末端的是______________DNA连接酶，启动子的作用是与_______识别和结合，从而驱动基因的转录过程。

(2)图中需要进行离体组织培养的过程是______(用标号)。由棉株1获得单倍体苗的途径为：花粉通过诱导首先形成________进而再分化为试管苗。植物组织培养的原理是每个细胞都具有________的特点

(3)若确定目的基因（抗虫基因已导入受体细胞，而要继续确定目的基因是否成功表达）可在分子水平上采用进行________技术检测，在个体生物学水平上鉴定是进行_______。

(4)种植该基因植物时，为避免它所携带的抗虫基因通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”，则应把抗虫基因导入到叶肉细胞的________DNA中

Answer 1

【答案】 EcoRI和BamHI E.coli RNA聚合酶 ①和③ 愈伤组织 全能性 抗原—抗体杂交 抗虫接种试验 线粒体

【解析】【试题分析】本题主要考查基因工程和植物细胞工程有关知识的应用。

（1）载体和含有目的基因的外源DNA中均含有限制酶EcoRI、SamⅠ和BamHI的切割位点，但限制酶SamⅠ的切割位点位于目的基因上，不能用该酶进行切割，因此切割获取目的基因时应选择限制酶EcoRI和BamHI；基因工程所用DNA连接酶有两类：Ecoli DNA连接酶和T4 DNA连接酶，其中只能连接黏性末端的是Ecoli DNA连接酶，启动子是RNA聚合酶的识别和结合位点；

（2）图中需要进行离体组织培养的是①花药离体培养和③受体细胞培养成棉株2；由棉株1获得单倍体苗的途径为：花粉通过诱导首先脱分化形成愈伤组织，进而再分化为试管苗；植物组织培养的原理是植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力，称为植物的全能性；

(3)抗虫基因已导入受体细胞，而要继续确定目的基因是否成功表达，即检测目的基因是否翻译成蛋白质，在分子水平上采用抗原—抗体杂交技术；因导入的是抗虫基因，故在个体生物学水平上鉴定是进行抗虫接种试验；

（4）为避免抗虫基因通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”，则应把抗虫基因导入到叶肉细胞的叶绿体(或线粒体)DNA中，因叶绿体(或线粒体)遗传表现为母系遗传，目的基因不会通过花粉传递。