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18．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断．如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：

（1）制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞的融合和动物细胞培养技术．
（2）在B淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤所阻断．而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径．
①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的氨基嘌呤成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．
②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是既能大量增殖，又能产生特异性抗体．
③培养杂交瘤细胞的条件包括：无菌、无毒的环境、营养、温度、气体环境．
（3）哺乳动物在怀孕初期能为胚胎的收集提供可能，这是因为哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内处于游离状态，没有与母体子宫建立组织上的联系；在胚胎移植技术中收集到胚胎后要进行检查、培养或保存以及移植后的检查等步骤；胚胎移植时可利用激素对受体进行同期发情处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能．
（4）为了更多地生产出人HCG，有人构思采用胚胎分割技术，把一个胚胎分割成很多很多份数，进而培育出大量相同的转基因牛．你认为这种方法可行吗？为什么？不可行，因为胚胎分割的份数越多，操作难度会越大，移植的成功率也越低．

分析 1．制备单克隆抗体的诱导过程有：正常小鼠免疫处理、动物细胞的融合（物、化、生法）、杂交瘤细胞的筛选与培养、专一抗体检验阳性细胞培养、单克隆抗体的提纯．
2．单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体．
3．二次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞．
4．杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．
5、动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理．通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染．此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害．②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等．通常需加入血清、血浆等天然成分．③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4．④气体环境：95%空气+5%CO2．O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH．

解答 解：（1）制备单克隆抗体的诱导过程有：正常小鼠免疫处理、动物细胞的融合、杂交瘤细胞的筛选与培养、专一抗体检验阳性细胞培养、单克隆抗体的提纯．要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术．
（2）①氨基嘌呤可以阻断在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA．因此配制的HAT培养基中添加氨基嘌呤的成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．
 ②杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．
③培养杂交瘤细胞的条件包括：无菌、无毒的环境、营养、温度和气体环境．
（3）哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内处于游离状态，没有与母体子宫建立组织上的联系，这样为胚胎的收集提供了可能．在胚胎移植技术中，收集到胚胎后要先进行检查、培养或保存，然后再进行移植，以及移植后的检查等步骤．胚胎移植时可利用激素对受体进行同期发情处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能．
（4）胚胎分割的份数越多，操作难度会越大，移植的成功率也越低，所以该方法不可行．
故答案为：
（1）动物细胞的融合  动物细胞培养
（2）①氨基嘌呤  ②既能大量增殖，又能产生特异性抗体  
③哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内处于游离状态，没有与母体子宫建立组织上的联系  检查  培养或保存   同期发情   免疫排斥 
（4）不可行   因为胚胎分割的份数越多，操作难度会越大，移植的成功率也越低

点评 本题考查动物细胞培养、胚胎移植和胚胎分割的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的具体过程及条件；识记胚胎移植的过程，理解胚胎分割的特点，再结合所学的知识准确答题．

练习册系列答案
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8．机体内环境稳态是进行正常生命活动的必要条件．请回答下列有关问题：
（1）肾上腺素既是一种神经递质，也是一种激素．从功能上看，它是体内的一种信息分子．药物V和肾上腺素具有相似的结构，都能直接作用于心脏，调节心率．由此推测，心脏细胞表面与药物V和肾上腺素结合的受体可能相同．
（2）人们用肾上腺素和药物V进行有关研究．下表为分组实验结果，请完善实验报告．
实验目的：探究药物V和肾上腺素对小鼠耗氧量的影响．
材料用具：小鼠若干只，注射器，耗氧检测装置若干（如图），肾上腺素溶液和药物V溶液（用生理盐水配制）．
方法步骤：①选取大小、生长状况相同的小鼠若干，均分为四组．每组小鼠按表中所示注射药剂，其中A组注射等量生理盐水．
组
别		注射药剂种类耗氧量
（×103mL）
药物V肾上腺素
A  2.0
B+ 1.7
C +2.5
D++2.1
注：“+”表示注射该药剂
②将每组小鼠分别放入装置中，开始时大烧杯内外的液面等高；并将装置放在相同环境中，10分钟后记录大烧杯内液面升高值，计算耗氧量并求出各组的平均值．根据表中实验结果可知，药物V和肾上腺素共同作用的效应是相互拮抗的．
（3）除了控制相同的环境条件外，实验中应再设置一个不放入小鼠的对照装置，其设置目的是用于去除非生物因素对实验结果的影响，从而使测得的数值更精确．
（4）当细菌感染小鼠皮肤伤口时，小鼠机体首先发起攻击的免疫细胞是吞噬细胞．未被清除的病原体经过一系列过程，其抗原会刺激B细胞增殖分化为浆细胞和记忆细胞．
（5）当给小鼠饲喂过咸的食物后，小鼠机体对细胞外液渗透压的调节过程是：
9．果蝇的眼色由两对独立遗传的基因（A、a和B、b）控制，其中B、b仅位于X染色体上．A和B同时存在时果蝇表现为红眼，B存在而A不存在时为粉红眼，其余情况为白眼．
（1）一只纯合粉红眼雌果蝇与一只雄果蝇杂交，F1代全为红眼．
①亲代雌果蝇的基因型为aaXBXB，F1的雄果蝇能产生4种基因组成的配子．
②F1雌、雄果蝇随机交配，F2粉红眼果蝇中雌、雄比例为2：1，F2红眼果蝇中杂合子占$\frac{5}{6}$．
（2）果蝇体内另有一对基因T、t，与基因A-a、B-b均能自由组合，当t基因纯合时对雄果蝇没有影响，但会使雌果蝇性反转成不育的雄果蝇．让一只纯合红眼雌果蝇与一只白眼雄果蝇杂交，所得F1代的雌、雄果蝇随机交配，F2代雌、雄之比为3：5，且无粉红眼出现．
①亲代雌、雄果蝇的基因型分别为TTAAXBXB、ttAAXbY．
②用带荧光标记的B、b基因共同特有的序列作探针，与F2代雄果蝇的细胞装片中各细胞内染色体上B、b基因杂交，通过观察荧光点的个数可以确定细胞中B、b基因数目，从而判断该果蝇是否可育．在一个处于有丝分裂后期的细胞中，若观察到2个荧光点，则该雄果蝇可育：若观察到4个荧光点，则该果蝇不育．
6．为研究汽车尾气中可吸入颗粒物对人成熟T淋巴细胞的影响，用含不同浓度颗粒物的培养液培养T淋巴细胞，48h后检测Na+-K+-ATP酶活性及细胞活力．实验结果如下：
组别颗粒物浓度/μg•mL-1Na+-K+-ATP酶活性/U•mg pro-1细胞活力（相对值）
1035.81
25030.60.98
310020.50.87
420012.40.48
（SDH是有氧呼吸的关键酶．细胞活力通过测定各组细胞SDH总活性来表示，用于反映颗粒物对细胞的毒性，SDH总活性由该组细胞数及每个细胞SDH酶活性共同决定．下列说法不正确的是（　　）
A．汽车尾气中吸入的颗粒物可能抑制了细胞有氧呼吸的过程
B．该实验可用血球计数板计数，所计的细胞数均为活T淋巴细胞，计数表明随着颗粒物浓度的增加T淋巴细胞数减少
C．该评价指标所反映的颗粒物对T淋巴细胞的毒性，或表现为杀伤作用致细胞数减少
D．长期汽车尾气暴露的人群，T淋巴细胞执行的细胞免疫功能障碍，导致识别、攻击癌细胞的能力下降，癌症发病风险提高
13．在生物学经常利用放射性同位素原子替代非放射性同位素原子，在实验中追踪放射性流向，来确定元素流向，这种实验技术叫做放射性同位素标记法．下列有关放射性同位素标记法的说法中，正确的是（　　）
A．用H218O浇灌植物一段时间后，在H2O、CO2、（CH2O）、O2等物质中可检测到放射性
B．在豚鼠的胰脏腺泡细胞中注射3H标记的亮氨酸，科学家可以在核糖体、内质网、高尔基体、线粒体、细胞膜中依次检测到放射性
C．用15N标记某精原细胞的全部DNA，放入含14N的培养液中让其完成一次减数分裂，则形成的精细胞中有50%是有放射性的
D．用35S标记噬菌体的DNA，并以此浸染细菌，证明了DNA是遗传物质
3．某科学兴趣小组发现某植物雄株出现一突变体，为确定该突变基因的显隐性及其位置，设计了杂交实验方案：利用该突变雄株与多株野生纯合雌株杂交，观察记录子代中表现突变性状的雄株在全部子代雄株中所占的比率（用Q表示），以及子代中表现突变性状的雌株在全部子代雌株中所占的比率（用P表示）．下列有关叙述错误的是（　　）
A．若突变基因仅位于Y染色体上，则Q和P分别为1、0
B．若突变基因仅位于X染色体上且为显性，则Q和P分别为0、1
C．若突变基因仅位于X染色体上且为隐性，则Q和P分别为1、1
D．若突变基因仅位于常染色体上且为显性，则Q和P分别可能为$\frac{1}{2}$、$\frac{1}{2}$
10．图甲是人体稳态调节的部分示意图，图乙是睾丸酮（雄性激素）的调节机制示意图．请据图回答下列问题：

（1）由图甲可知，在机体稳态调节过程中，细胞间可通过激素、神经递质、免疫活性物质（淋巴因子）等信息分子进行信息交流．当T细胞活性下降时，会引起机体生成抗体的能力降低，其主要原因是：淋巴因子分泌量减少，影响了（不利于）B细胞增殖分化成浆细胞．
（2）GnRH与睾丸酮在化学本质上的差异是：前者是蛋白质（肽类），后者是固醇类（类固醇）．图乙中abcd过程体现了雄性激素分泌分级（分级调节）和（负）反馈的调节机制．
（3）研究表明吸食毒品会影响人体性腺功能．有研究者对某戒毒所的吸毒者进行了相关激素的检测，并与健康人作了比较，检测结果均值如下表：
组别平均年龄吸毒史吸毒量LH（mlu/mL）FSH（mlu/mL）睾丸酮（mlu/mL）
吸毒者23岁4年1.4g/d1.452.874.09
健康人23岁--4.666.66.69
据表可知，吸毒者会减弱的过程是图乙中的bcd（请填图中字母）．为了确定吸毒者睾丸酮水平低的原因是睾丸受损，还是LH和FSH减少引起的，可将其体内LH和FSH补充到健康人（正常）水平，一段时间后测定其睾丸酮含量，与健康者比较即可确定原因．
（4）环境激素是指由于人类的生产和生活活动而排放到周围环境中的某些化学物质．研究表明环境激素可沿着食物链（食物网）传递进入人体，被靶细胞接受后干扰精子生成，从而使人的生育能力降低．有的环境激素可使精子DNA分子发生断裂和DNA片段丢失，使得精子出现染色体结构变异（染色体缺失），造成精子畸形率升高．
7．下列关于植物组织培养的叙述中，正确的是（　　）
A．愈伤组织是由薄壁细胞团组成的
B．培养基中只需含有必需的营养物质就能促进愈伤组织发育成植株
C．野外切取的组织块可直接接种到培养基上
D．同一株绿色开花植物不同组织的细胞经过培养获得的植株基因型一定相同
10．紫杉醇具有独特的抗肿瘤作用．研究人员从红豆杉中发现了一种具有产紫杉醇能力的内生真菌．为探究制备红豆杉内生真菌原生质体（不含细胞壁）的适宜pH和温度，进行了如下实验：①培养菌株，离心收集菌丝体，并用渗透压稳定剂洗涤两次；②将获得的菌丝体，分别置于不同pH或温度的培养液中，并加入适量酶液，震荡、摇匀后，每隔一段时间，取样、过滤、离心，用渗透压稳定剂洗涤两次后，收集纯化的原生质体．③统计原生质体数量，结果如下．
酶解温度（℃）　　原生质体产量（×106个/mL）
　　　　25　　　　12
　　　　28　　　　22
　　　　32　　　　31
　　　　35　　　　26
分析回答：
（1）步骤②中，加酶液的目的是去除内生真菌的细胞壁，洗涤时选用渗透压稳定剂的理由是维持原生质体的正常形态，防止其破裂．
（2）结果表明，制备红豆杉内生真菌原生质体的适宜条件是温度为32℃pH为5、酶解时间3～4小时．
（3）检验原生质体再生能力，需要配制再生固体培养基，培养基灭菌后需要冷却到50℃左右才能用来倒平板．
（4）实验中将收集到的原生质体浓度为30×106个/mL培养液先稀释104倍，再各取0.1mL稀释液分别均匀涂布在3个再生固体培养基上培养．一段时间后，统计得到的菌落数分别为：27、21、24．则原生质体再生率（能再生的原生质体数占全部原生质体的比例）约为8%．

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