Question

16．请回答下列关于转基因抗虫棉的相关问题：
（1）从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具酶是限制酶，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开．
（2）培育过程中构建的重组DNA分子包括复制原点、目的基因、标记基因、终止子和启动子．
（3）若检测目的基因是否插入到受体细胞的DNA上，方法是DNA分子杂交技术；若检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质，方法是抗原-抗体杂交．
（4）将已导入目的基因的棉花细胞培育成幼苗，需经过脱分化和再分化两个过程．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）获取目的基因需要用限制酶，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开．
（2）该培育过程中构成的重组DNA分子包括复制原点、目的基因、标记基因、终止子和启动子．
（3）用DNA分子杂交技术检测目的基因是否插入到受体细胞的DNA上，用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质．
（4）将已导入目的基因的棉花细胞培育成幼苗利用了植物组织培养技术，需经过脱分化和再分化两个过程．
故答案为：
（1）限制酶    特定核苷酸序列    磷酸二酯
（2）启动子
（3）DNA分子杂交技术   抗原-抗体杂交
（4）脱分化    再分化

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．