Question

13．为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验．

（1）配制好的培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌．步骤③与步骤②中培养基成分相比，最大的区别是石油是唯一碳源．
（2）同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示．该同学的接种方法是稀释涂布平板法，出现图B结果可能的操作失误是涂布不均匀．
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接人0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57．据此可得出每升样品中的活菌数为5.7×10⁷个．
（4）步骤⑤需要振荡培养，原因是提高培养液中（溶解）氧的含量，通过振荡可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率．
（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油能力最强的细菌．

Answer 1

分析 本题是对微生物实验室培养过程中对实验用品进行灭菌常用的方法及检测培养基灭菌是否彻底的方法、估算样品中菌株数的方法、微生物常用的接种方法和具体操作步骤的综合性考查，回忆微生物实验室培养过程中对实验用品进行灭菌常用的方法及检测培养基灭菌是否彻底的方法、估算样品中菌株数的方法、微生物常用的接种方法和具体操作步骤，然后解答问题．

解答 解：（1）配制好的培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌．步骤③与步骤②中培养基成分相比，最大的区别是石油是唯一碳源．
（2）同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示．该同学的接种方法是稀释涂布平板法，出现图B结果可能的操作失误是涂布不均匀．
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接人0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57．据此可得出每升样品中的活菌数为（56+58+57）÷3÷0.1×1000×100=5.7×10⁷个．
（4）步骤⑤需要振荡培养，原因是提高培养液中（溶解）氧的含量，通过振荡可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率．
（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油能力最强的细菌．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌       石油是唯一碳源
（2）稀释涂布平板法        涂布不均匀
（3）5.7×10 ⁷
（4）提高培养液中（溶解）氧的含量，通过振荡可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率．
（5）筛选出分解石油能力最强的细菌

点评 本题考查微生物培养的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论能力．