Question

18．下列关于限制酶和DNA连接酶的理解，正确的是（　　）

• A． 限制酶识别特定的核苷酸序列并在特定位点切断磷酸二酯键
• B． DNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键
• C． 它们的化学本质都是蛋白质，都不能被反复使用
• D． 在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶

Answer 1

分析 1、关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来．
（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（3）结果：形成黏性末端或平末端．
2、DNA连接酶：
（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T₄DNA连接酶．这二者都能连接黏性末端，此外T₄DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低．
（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：
①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；
②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；
③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板．

解答 解：A、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，只能切割特定序列内特定位点的磷酸二酯键，形成黏性末端或平末端，A正确；
B、DNA连接酶可以恢复DNA分子中的磷酸二酯键，C错误；
C、限制酶和DNA连接酶的化学本质都是蛋白质，限制酶和DNA连接酶能被反复利用，C错误；
D、DNA聚合酶用于连接单个脱氧核苷酸，而DNA连接酶连接DNA片段，因此在基因工程操作中不可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶，D错误．
故选：A．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，重点掌握基因工程的操作工具的特点及作用，能结合所学的知识准确判断各选项．