Question

19．研究发现紫草素和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示．

请回答：
（1）配制诱导形成愈伤组织的固体培养基，分装后要进行高压蒸汽灭菌；愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的．
（2）用于离体培养的茎切块，接种培养3---4d后发现少数培养基被污染，若是在材料附近的培养基中出现白、黑或绿等不同颜色、疏松、呈绒毛状菌落，则可判断属于真菌（填“细菌”或“真菌”）污染．
（3）无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染．
（4）为了从样本中获取乳酸菌A菌落，可用平板划线法或稀释涂布平板法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得，图乙和丙是经过纯化培养的结果，图乙接种时划线的顺序是①③②（用编号表示），通常使用的划线工具是接种环．图丙的获得需先将菌液稀释，目的是获得单一菌落．研究者得到了一个菌落分布如图丙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是涂布不均匀．
（5）可用金黄色葡萄球菌来分别检验紫草素和乳酸菌素抑菌特性，抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈．可通过测定透明圈的大小来比较紫草素和乳酸菌素的抑菌效果．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：图甲表示植物组织培养过程和紫草素的提取、检验，图乙表示平板划线法，图丙表示稀释涂布平板法．

解答 解：（1）配制培养基分装后，为防止杂菌污染培养物，要对培养基进行高压蒸汽灭菌；接种前，还要对紫草茎切块进行消毒处理．紫草茎切块经诱导脱分化后，形成由排列疏松的薄壁细胞组成的愈伤组织．
（2）根据在材料附近的培养基中出现白、黑或绿等不同颜色疏松，成绒毛状菌落，这些是真菌菌落的特征，由此可以推断该培养过程已被真菌污染．
（3）无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染．
（4）为了从样本中获取乳酸菌A菌落，可用平板划线法或稀释涂布平板法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得，图乙和丙是经过纯化培养的结果，图乙接种时划线的顺序是①③②，通常使用的划线工具是接种环．图丙的获得需先将菌液稀释，目的是获得 单一菌落．研究者得到了一个菌落分布如图丙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是涂布不均匀．
（5）可用金黄色葡萄球菌来分别检验紫草素和乳酸菌素抑菌特性，抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈．抑菌实验时，会出现以抑菌物质为中心的透明圈，透明圈越大，说明抑菌效果越好，所以可通过测定透明圈的大小来比较紫草素和乳酸菌素的抑菌效果．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌   　薄壁细胞
（2）真菌
（3）火焰
（4）平板划线    　稀释涂布平板      ①③②接种环      单一      涂布不均匀
（5）透明圈的大小

点评 本题的知识点是植物组织培养中的无菌技术，根据菌落特征判断污染微生物，微生物常用的接种方法，抑菌效果的判断，主要考查学生运用所学的知识解决生产生活中实际问题的能力．