Question

9．欲从腐乳中分离筛选出产蛋白酶活力高的毛霉菌株，设计了如下实验流程：

回答下列问题：
（1）毛霉属于真核生物．在腐乳制作中，主要利用毛霉等微生物产生的蛋白酶和脂肪酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质．
（2）步骤②进行涂布前，需将孢子悬浮液进行梯度稀释，进行梯度稀释的目的是增加悬浮液的稀释度，涂布培养能分离到单菌落．若进行10倍稀释，一般吸取lml悬浮液注入9ml无菌水中，混匀．
（3）孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌，在孟加拉红培养基中加入氯酶素可以抑制细菌的生长．从功能上看，孟加拉红培养基属于选择培养基．
（4）毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈，在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙，其菌落直径分别为3.2cm、2.8cm、2.9cm，其菌落与透明圈一起的直径分别为3.7cm、3.5cra、3.3cm．应选择菌落乙作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌．

Answer 1

分析 1、毛霉是一种丝状真菌，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有发达的白色菌丝．
2、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型．腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸．

解答 解：（1）毛霉是真菌，属于真核生物．在腐乳制作中，主要利用毛霉等微生物产生的蛋白酶和脂肪酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质．
（2）步骤②进行涂布前，需将孢子悬浮液进行梯度稀释，进行梯度稀释的目的是增加悬浮液的稀释度，涂布培养能分离到单菌落．若进行10倍稀释，一般吸取lml悬浮液注入9ml 无菌水中，混匀．
（3）孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌，在孟加拉红培养基中加入氯酶素可以抑制细菌的生长．从功能上看，孟加拉红培养基属于选择培养基．
（4）毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈，在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙，其菌落直径分别为3.2cm、2.8cm、2.9cm，其菌落与透明圈一起的直径分别为3.7cm、3.5cm、3.3cm．挑选透明圈与菌落直径比大的菌落中的菌株用于生产，菌落甲=$\frac{3.7}{3.2}$≈1.16，菌落乙=$\frac{3.5}{2.8}$=1.25，菌落丙=$\frac{3.3}{2.9}$≈1.14．因此应选择菌落乙作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌．
故答案为：
（1）真           蛋白酶和脂肪
（2）增加悬浮液的稀释度，涂布培养能分离到单菌落        9ml 无菌水
（3）选择
（4）乙

点评 本题考查腐乳的制作和微生物的培养，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验选用的材料、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．