Question

2．科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症．下列相关实验设计中，合理的是（　　）

• A． 可利用小鼠的β-珠蛋白基因通过PCR技术复制出β-珠蛋白基因
• B． 构建基因表达载体是基因工程的核心操作
• C． 用Ca²⁺处理大肠杆菌后，将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中
• D． 用含有四环素的培养基筛选出的大肠杆菌一定是含有β-珠蛋白基因

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、可利用小鼠的β-珠蛋白基因通过PCR技术复制出β-珠蛋白基因，A正确；
B、构建基因表达载体是基因工程的核心操作，B正确；
C、根据题意可知，目的基因是四环素抗性基因，受体细胞不能含有抗性基因，因此用Ca²⁺处理大肠杆菌后，将表达载体导入不具有四环素抗性的大肠杆菌中，C错误；
D、用含有四环素的培养基筛选出的大肠杆菌导入的可能是普通质粒或重组质粒，不一定含有β-珠蛋白基因，D错误．
故选：AB．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．