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18.苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白.下图是转Bt毒素 蛋白基因植物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),据图回答下列问题.

(1)将图中①的DNA用Hindlll、BamH I完全酶切后,反应管中有4种DNA片段.
(2)图中②表示Hindlll与BamH I酶切、DNA连接酶连接的过程,此过程可获得2种重组质粒;如果换用BstI与BamH I酶切,目的基因与质粒连接后可获得1种重组质粒.
(3)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体,使细胞膜穿孔,肠细胞裂解,昆虫死亡.而该毒素蛋白对人类的风险相对较小,原因是人类肠上皮细胞表面无相应的特异性受体.
(4)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种,其目的是降低害虫种群中的抗性基因频率的增长速率.

分析 分析题图:图示表示转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程,其中①是含有目的基因的外源DNA分子,其中含有限制酶HindⅢ、BamHⅠ和BstⅠ的切割位点,且BamHⅠ和BstⅠ的识别序列相同;②表示基因表达载体的构建过程.③表示采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞的过程;④表示目的基因的表达.

解答 解:(1)图①中,从苏云金杆菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3种DNA片段.而质粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2种DNA片段,其中有1种与目的基因相同,所以反应管中有4种DNA片段.
(2)因HindⅢ切出的末端与BamHⅠ切出末端不同,所以用DNA连接酶连接形成的重组质粒有2种;而BstⅠ与BamHⅠ切出的末端相同,所以用DNA连接酶能连接形成1种重组质粒.
(3)生物的细胞表面的受体具有特异性,人类肠上皮细胞没有昆虫肠上皮细胞表面的特异受体.所以该毒素蛋白对人类的风险相对较小.
(4)转基因与非转基因作物混种,可降低抗性作物对害虫的选择性,使害虫种群中的抗性基因频率增长率减慢.
故答案为:
(1)4
(2)2   1
(3)表面无相应的特异性受体
(4)抗性

点评 本题结合转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程图,考查基因工程、酶、生物进化等相关知识,要求考生识记基因工程的相关知识点,能根据图中质粒和外源DNA分子上的酶切位点,解答第(1)(2)题;还要考生识记酶的特性,掌握生物进化的相关知识.

练习册系列答案
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3.2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家.绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能.如图1为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:

(1)图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒.限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-.在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点.
①如图2所,请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端.
②在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接?理由是:可以连接,因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的.
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是显微注射技术.
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因,其作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因.获得的转基因克隆猪,可以解决的医学难题是,可以避免发生免疫排斥反应.
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:②①③④(填序号).
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白.

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