Question

15．请分析回答下列有关现代生物科技方面的问题：
①基因工程的基本操作程序中，第三步是将目的基因导入受体细胞，如受体细胞是植物细胞，可以用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法法；如果是动物细胞用显微注射法法，受体细胞选用动物的受精卵细胞；如果是微生物用钙离子处理法．
②通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是限制性核酸内切酶（或限制酶）．
③通常在第四步中，若用分子鉴定法检测目的基因是否成功导入所用技术是DNA分子杂交技术，检测目的基因是否成功转录所用技术是分子杂交技术，目的基因是否成功表达所用技术是抗原-抗体杂交．
④利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在热稳定DNA聚合酶的作用下延伸形成DNA．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：①若受体细胞是植物细胞，可以用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法 法；若受体细胞是动物细胞，最有效的方法是显微注射法，受体细胞选用动物的受精卵细胞，因为受精卵的全能性最高；若受体细胞是微生物，则用钙离子处理法．
②获取目的基因和构建基因表达载体时都需要使用限制酶．
③在分子水平上鉴定和检测目的基因是否成功导入所用技术是DNA分子杂交技术，检测目的基因是否成功转录所用技术是分子杂交技术，目的基因是否成功表达所用技术是抗原-抗体杂交．
④利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在热稳定DNA聚合酶的作用下延伸形成DNA．
故答案为：
①农杆菌转化法   基因枪法  花粉管通道法   显微注射法   受精卵  钙离子处理法
②限制性核酸内切酶（或限制酶）
③DNA分子杂交技术   分子杂交技术   抗原-抗体杂交
④热稳定DNA聚合

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．