Question

11．血清白蛋白可用于治疗组织水肿、抗血小板凝集等疾病，科学家利用基因工程技术成功培育出了转基因羊，从其分泌的乳汁中可提取血清白蛋白．请回答下列问题：
（1）目前获得目的基因常用方法之一是从基因文库中获取，进而用PCR技术扩增，此技术应满足的条件有：适宜的温度和PH、原料、模板、能量、引物、热稳定DNA聚合（Taq）酶．
（2）将血清白蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子 等调控组件重组在一起，构建基因表达载体，该过程需要用限制酶和DNA连接酶，然后通过显微注射技术，导入羊的受精卵中．通过早期胚胎培养发育成桑椹胚或囊胚后移植到受体母羊子宫内，最终获得分泌的乳汁中含有血清白蛋白的乳腺生物反应器．
（3）可利用抗原-抗体杂交技术检测转基因羊的乳汁中是否含有血清白蛋白．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）目前获得目的基因常用方法之一是从基因文库中获取，进而用PCR技术扩增；PCR技术扩增的条件有：适宜的温度和pH、原料、模板、能量、一对引物、热稳定DNA聚合（Taq）酶．
（2）基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因和表达基因，因此构建基因表达载体时，要将目的基因（血清白蛋白基因）与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；构建基因表达载体时，首先要用限制酶切割外源DNA分子和运载体，其次要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接在一起；将目的基因导入动物细胞常用显微注射法．
（3）检测目的基因是否表达形成相应的蛋白质可利用抗原抗体杂交技术．
故答案为：
（1）基因文库  PCR引物（若添加扩增缓冲液算对）  热稳定 DNA 聚合（Taq）
（2）启动子     限制酶和DNA连接      显微注射
（3）抗原-抗体杂交

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．