Question

8．为了获得纯度高的大肠杆菌，需要对大肠杆菌进行培养和分离．培养大肠杆菌一般用牛肉膏-蛋白胨-琼脂培养基．
（1）称量时，由于牛肉膏比较黏稠，可以用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量．由于牛肉膏和蛋白胨容易吸潮，称量时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖．
（2）在牛肉膏-蛋白胨-琼脂培养基上的大肠杆菌能生长，说明培养基含有碳源、氮源、无机盐、水等大肠杆菌生长所需的营养要素．
（3）微生物纯化培养可以通过多种接种方法如平板划线法和稀释涂布平板法等，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个菌落，从而获得纯菌株．

Answer 1

分析 1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：
（1）计算：依据是培养基配方的比例．
（2）称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取．牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖．
（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL．
（4）调pH．
（5）灭菌：对培养基用高压蒸汽灭菌法，对培养皿等用干热灭菌法．
（6）倒平板．
2、纯化大肠杆菌：
（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落．
（2）微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）称量时，由于牛肉膏比较黏稠，可以用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量．由于牛肉膏和蛋白胨容易吸潮，称量时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖．
（2）培养微生物的培养基都必须含有碳源、氮源、无机盐、水等营养要素．
（3）接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法；采用这两种方法纯化大肠杆菌时，可使大肠杆菌在固体培养基上形成单个菌落，从而获得纯菌株．
故答案为：
（1）玻璃棒　称量纸　容易吸潮
（2）碳源、氮源、无机盐、水
（3）平板划线法　稀释涂布平板法　菌落

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及功能；识记接种微生物常用的两种方法，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．