Question

15．我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个．某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙．

回答下列相关问题：
（1）图甲中滤膜的孔径应小于（“大于”或“小于”）大肠杆菌．受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？用滤膜过滤除菌．
（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入氮源（一种营养成分），以及琼脂．伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色．
（3）该小组通过统计黑色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目．理论上他们的统计值要比实际偏低（“偏高”或“偏低”），理由是两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落．
（4）如图所示的操作是培养基配置过程中的倒平板，该操作的正确使用顺序是④→①→②→③（用图中的序号和箭头表示）．③步骤操作的目的是既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染．

Answer 1

分析 1、分析题图可知，实验将待测水样进行过滤，得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，则滤膜上小孔的直径大小需要控制．
2、培养基的基本成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源，另外鉴别培养基是固体培养基，必须加入凝固剂琼脂．
3、配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项
①倒平板的温 度一般50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固；
②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染．

解答 解：（1）分析图解可知，实验将待测水样进行过滤，得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，即图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌．受此启发，对某些不耐高温的试剂可以用滤膜过滤除菌．
（2）培养基的基本成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源，另外鉴别培养基是固体培养基，必须加入凝固剂琼脂．图中乳糖为碳源，因此培养基中还应该加入氮源．伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色．
（3）在伊红美蓝培养基上，可以鉴定出菌落为黑色的具有金属光泽的大肠杆菌，因此该小组通过统计黑色菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目．由于培养基中两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落，因此理论上他们的统计值比实际值偏低．
（4）如图所示的操作是培养基配置过程中的倒平板，该操作的正确使用顺序是④拔棉塞→①锥形瓶的瓶口通过酒精灯→②倒平板→③培养基倒置．平板倒置既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染．
故答案为：
（1）小于   用滤膜过滤除菌
（2）氮源      琼脂      黑色
（3）黑色菌落    偏低     两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落
（4）④→①→②→③既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染

点评 本题考查了微生物的分离与培养、培养基的成分以及大肠杆菌的鉴定等有关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．