Question

18．回答与微生物实验室培养有关的问题：
（1）在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是琼脂．若培养基需调节pH，则应在灭菌之（填“前”或“后”）调节．
（2）为防止外来杂菌入侵，对玻璃器皿和金属用具等可采用干热灭菌法进行灭菌．
（3）如图为平板划线法接种后的示意图．在划线接种的整个操作过程中，对接种环至少需进行6次灼烧灭菌．接种后盖上皿盖，将平板倒置放入恒温箱中培养，这样放置的目的是避免培养基被污染和防止培养基水分过快挥发．
（4）用稀释涂布平板法统计活菌数目时，每隔一个“时间间隔”统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、实验室常用的灭菌方法
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；
③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min．

解答 解：（1）在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是琼脂．在配置培养基时，应先调节pH，后灭菌．
（2）为防止外来杂菌入侵，对玻璃器皿和金属用具等可采用干热灭菌法进行灭菌．
（3）接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，以防止造成污染，因此完成步骤④共需灼烧接种环6次．接种后盖上皿盖，为了避免培养基被污染和防止培养基水分过快挥发，应将平板倒置放入恒温箱中培养．
（4）用稀释涂布平板法统计活菌数目时，每隔一个“时间间隔”统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目．
故答案为：
（1）琼脂    前
（2）玻璃器皿和金属用具
（3）6      倒置       避免培养基被污染和防止培养基水分过快挥发
（4）菌落数目稳定时的记录

点评 本题考查微生物的分离与培养、培养基的配制以及消毒和灭菌等有关方面的知识，意在考查学生对相关实验的实验原理、步骤、操作技能的掌握情况．