Question

11．油烟污染由多种有害物质组成，不易降解．某同学从长期受到金龙鱼油产生的油烟污染的土壤中分离出油烟降解菌，其筛选分离过程如图所示，回答下列问题：

（1）图中①③的过程称为选择培养，其目的是初步筛选出能分解油烟的微生物，并增大其浓度．
（2）该同学将 ③中的微生物培养液接种到培养基④之前，进行了梯度稀释，制成稀释倍数分别为10^-1、10^-2、10^-3的不同稀释度的样品液，在三个梯度稀释倍数下，分别吸取0.1mL样品液涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个培养基，最终形成的菌落的数目如表所示：

稀释倍数培养基编号	甲	乙	丙
10-1	168	172	170
10-2	12	14	19
10-3	2	3	6

应选择稀释倍数为10^-1的培养基进行计数，稀释前每毫升菌液中含有油烟降解菌的数目为1.7×10⁴，这种计数方法统计的数据结果往往会比显微镜直接计数的结果小，其原因是该方法只是统计活菌数量，并且当多个细菌相互靠近时，会形成一个菌落，造成计数结果偏小．
（3）在⑤中的固体培养基应加入金龙鱼油，其作用是为微生物提供碳源和能源．培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法．若要判断固体培养基是否起到了选择的作用，应如何设计实验再设置一个牛肉膏蛋白胨培养基作对照，在对照培养基和选择培养基上接种等量的菌液后比较两培养基中菌落的数目．

Answer 1

分析 1、结合题干分析题图：图中以“金龙鱼油”作为唯一碳源的培养基来培养土壤样品，能够分离出能够分解油烟的微生物．
2、选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率．
3、检测土壤中细菌总数，可以看出采用的计数方法是稀释涂布平板法进行计数．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数．

解答 解：（1）分析图解可知，图中①③的培养过程中加入金龙鱼油作为唯一碳源，能够初步筛选出能分解油烟的微生物，并增大其浓度，因此称为选择培养．
（2）利用稀释涂布平板法对微生物进行计数时选择菌落数在30～300的进行记数，结合表格数据可知，应选择稀释倍数为10^-1的培养基进行计数，稀释前每毫升菌液中含有油烟降解菌的数目=（168+172+170）÷3÷0.1×10^-1=1.7×10⁴．该方法只是统计活菌数量，并且当多个细菌相互靠近时，会形成一个菌落，因此这种计数方法统计的数据结果往往会比显微镜直接计数的结果小．
（3）在⑤中的固体培养基应加入金龙鱼油，其作用是为微生物提供碳源和能源．培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法．若要判断固体培养基是否起到了选择的作用，应再设置一个牛肉膏蛋白胨培养基作对照，在对照培养基和选择培养基上接种等量的菌液后比较两培养基中菌落的数目．
故答案为：
（1）选择培养      初步筛选出能分解油烟的微生物，并增大其浓度
（2）10^-1   1.7×10⁴     该方法只是统计活菌数量，并且当多个细菌相互靠近时，会形成一个菌落，造成计数结果偏小
（3）为微生物提供碳源和能源    高压蒸汽灭菌法   再设置一个牛肉膏蛋白胨培养基作对照，在对照培养基和选择培养基上接种等量的菌液后比较两培养基中菌落的数目

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识啊，要求考生掌握选择培养基对微生物进行选择培养的原理和方法，掌握测定某种微生物数量的方法，同时具有一定的实验设计能力，掌握对照实验的设计原则．