题目内容
降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个核苷酸的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图。
在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：
（1）Klenow酶是一种________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。
（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点－G↓AATTC－）和BamHⅠ（识别序列和切割位点－G↓GATCC－）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它________。
②将该目的基因导入大肠杆菌常用的方法是________。
③设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是________。
④要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有________。
⑤在进行DNA测序时采用的方法是________。
经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是________。
（3）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是________。
答案：
解析：
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（1）DNA聚合 126 （2）①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少（2分） ②Ca+活化法 ③保证目的基因和载体的定向连接（或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接）（2分） ④标记基因 ⑤DNA分子杂交技术 合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象（2分） （3）蛋白质工程（2分） |
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