题目内容
10．回答下列有关生物工程的问题从人的胰岛细胞中制备胰岛素编码基因，将其与合适的质粒用产自大肠杆菌的DNA连接酶拼接成重组分子，后者导入酵母中便可实现重组人胰岛素的工业化生产，用于糖尿病的治疗．
（1）下列与质粒的基本单位相同的有①③ （填编号）
①胰岛素基因 ②mRNA ③拟核DNA ④人胰岛素
（2）若人胰岛素编码基因两端是用限制酶PstI（识别序列和切割位点如图2所示）切开的，那么如图1所示的质粒应使用限制酶NsiⅠ切开，才能保证人胰岛素编码基因与质粒直接粘连拼接．
（3）已转到重组质粒上的单个人胰岛素编码基因能否再用（2）题中的限制酶切开？不能，理由是没有相应的识别序列．
（4）将重组质粒导入酵母细胞，并进行大规模培养便可获得人胰岛素产品．上述人胰岛素产品生产过程中利用到的生物工程领域有①②．（填编号）
①发酵工程 ②基因工程 ③细胞工程 ④酶工程
（5）医学上还利用生物工程技术将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，融合后细胞经培养可产生单克隆抗体，其理论依据有②③．（填编号）
①骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
②骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体
③B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
④B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体．
分析 分析题图：图1质粒中含有四种限制酶的切割位点；图2五种限制酶中，限制酶NsiⅠ切割形成的黏性末端与限制酶PstI切割形成的黏性末端相同．
解答 解：（1）质粒的化学本质是DNA，其基本单位是脱氧核苷酸．胰岛素基因和拟核DNA的基本单位脱氧核苷酸，mRNA的基本单位是核糖核苷酸，胰岛素的基本单位是氨基酸．
（2）由图2可知，五种限制酶中，限制酶NsiⅠ切割形成的黏性末端与限制酶PstI切割形成的黏性末端相同．构建基因表达载体时应该用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，若人胰岛素编码基因两端是用限制酶PstI切开的，则质粒也应该用限制酶PstI切开，但质粒中没有该酶的识别序列和切割位点，但限制酶NsiⅠ切割形成的黏性末端与限制酶PstI切割形成的黏性末端相同，因此质粒应使用限制酶 NsiⅠ切开，这样才能保证人胰岛素编码基因与质粒直接粘连拼接．
（3）用DNA连接酶连接目的基因与运载体后，目的基因两侧的碱基序列既不能被限制酶PstI识别，也不能被限制酶NsiⅠ识别，因此不能被这两种酶切割．
（4）将重组质粒导入酵母细胞需要采用基因工程技术，进行大规模培养需要采用发酵技术．
（5）单克隆抗体制备的原理：骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体；B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖．两种融合形成的杂交瘤细胞既可无限增殖，也能产生抗体．
故答案为：
（1）①③
（2）NsiⅠ
（3）不能 没有相应的识别序列
（4）①②
（5）②③
点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作工具的作用及操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息准确答题．
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2．在“检测生物组织中有机物”的实验方案中，选用的试剂、待测样品和相应的结果预测如表所示，正确的是（ ）
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| A | 苏丹Ⅲ染液 | 花生子叶切片 | 蓝色 |
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