题目内容
回答微生物培养与基因工程相关问题．
Ⅰ、下列实验设计摸拟了巴斯德的曲颈瓶实验：把大豆加水煮烂，用两层纱布滤取豆汤备用；如图1所示，在三角瓶里注入50mL豆汤，用装有S型弯玻璃管的药棉塞住瓶口；再把三角瓶放入盛水的锅里隔水加热，使锅里的水沸腾5min；取出三角瓶冷却后放在温暖的阴暗处（日平均温度在20℃以上）；逐天观察．
（1）请为本实验设计对照组： ．
（2）如图2所示装置中的豆汤在7天后开始腐败．原因是 ．
（3）从腐败豆汤中取培养液分离培养某细菌，在105稀释度下涂布0.1mL的菌悬液，3个平板上菌落数的平均值是56，则原培养液中的细菌数目是 个/毫升．
Ⅱ、生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M（单细胞）产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如图3所示）．
（4）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ，培养基灭菌采用的最适方法是 法．
（5）如图3所示是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图．则获得图A效果的接种方法是 ，图B效果的接种方法是 ．
Ⅰ、下列实验设计摸拟了巴斯德的曲颈瓶实验：把大豆加水煮烂，用两层纱布滤取豆汤备用；如图1所示，在三角瓶里注入50mL豆汤，用装有S型弯玻璃管的药棉塞住瓶口；再把三角瓶放入盛水的锅里隔水加热，使锅里的水沸腾5min；取出三角瓶冷却后放在温暖的阴暗处（日平均温度在20℃以上）；逐天观察．
（1）请为本实验设计对照组：
（2）如图2所示装置中的豆汤在7天后开始腐败．原因是
（3）从腐败豆汤中取培养液分离培养某细菌，在105稀释度下涂布0.1mL的菌悬液，3个平板上菌落数的平均值是56，则原培养液中的细菌数目是
Ⅱ、生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M（单细胞）产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如图3所示）．
（4）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供
（5）如图3所示是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图．则获得图A效果的接种方法是
考点：微生物的分离和培养,基因工程的原理及技术
专题：
分析：1、培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；
2、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌；
3、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法．
2、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌；
3、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法．
解答：
解：（1）大豆加水煮烂时会杀死其中的微生物，探究实验需要遵循对照原则，该实验的实验组采用了加水煮熟的豆汤，则对照组应用未隔水加热的豆汤进行相同实验．
（2）由于少数细菌可能通过棉塞进入三角瓶，同时灭菌时未被杀死的芽孢开始繁殖，因此如图2所示装置中的豆汤在7天后开始腐败．
（3）菌落数的平均值是56，稀释倍数105，所用稀释液的体积为0.1ml，则菌落数=（56÷0.1）×l05=5.3×107 个．
（4）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源；培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法．
（5）接种微生物常用的方法是稀释涂布平板法和平板划线法，获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法，图B效果的接种方法是平板划线法．
故答案为：
（1）用未隔水加热的豆汤进行相同实验，一段时间后去除曲颈进行相同实验
（2）少数细菌可能通过棉塞进入三角瓶，同时灭菌时未被杀死的芽孢开始繁殖
（3）5.6×107
（4）碳源 高压蒸汽灭菌
（5）稀释涂布平板法 平板划线法
（2）由于少数细菌可能通过棉塞进入三角瓶，同时灭菌时未被杀死的芽孢开始繁殖，因此如图2所示装置中的豆汤在7天后开始腐败．
（3）菌落数的平均值是56，稀释倍数105，所用稀释液的体积为0.1ml，则菌落数=（56÷0.1）×l05=5.3×107 个．
（4）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源；培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法．
（5）接种微生物常用的方法是稀释涂布平板法和平板划线法，获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法，图B效果的接种方法是平板划线法．
故答案为：
（1）用未隔水加热的豆汤进行相同实验，一段时间后去除曲颈进行相同实验
（2）少数细菌可能通过棉塞进入三角瓶，同时灭菌时未被杀死的芽孢开始繁殖
（3）5.6×107
（4）碳源 高压蒸汽灭菌
（5）稀释涂布平板法 平板划线法
点评：本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记灭菌技术，掌握实验室介质微生物常用的方法，能根据图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．
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