Question

1．从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．
（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．培养噬盐菌的菌样应从海滩等高盐环境采集．
（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以淀粉为惟一碳源的培养基，并在高温条件下培养．
（3）在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．
（4）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法．

获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法，图B效果的接种方法是平板划线法．一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（或培养过程被杂菌污染），应当怎样操作？增大稀释倍数（或严格无菌操作，原因与操作要对应）．

Answer 1

分析 （1）微生物培养的程序：a．器具的灭菌、b．培养基的配制、c．培养基的灭菌、倒平板、d．微生物接种、e．恒温箱中培养、f．菌种的保存；在培养的过程中一定要注意无菌操作．
（2）选择培养基：选择培养基是根据不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同而配制的．不同微生物对某些化学药品的抵抗力不同．利用这些特点，我们便可配制出适于某些微生物生长而抑制其他微生物的选择培养基，例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；根据对营养物质的特殊的需求，可以选择不同的微生物，比如尿素分解菌的氮源是尿素，纤维素分解菌的碳源是纤维素．

解答 解：（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，培养噬盐菌的菌样应从海滩等高盐环境中采集样品．
（2）纯化微生物时需要使用选择培养基，对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以淀粉为惟一碳源的培养基并在高温下培养．
（3）微生物培养的关键是无菌操作．
（4）据图分析，A培养皿中的菌落均匀属于稀释涂布平板法接种，B培养皿中的菌落分为5个区域，属于平板划线法接种．题干中的同学的操作结果的原因是菌液浓度过高（或培养过程被杂菌污染），所以应该增大稀释倍数（或严格无菌操作，原因与操作要对应）．
故答案为：
（1）海滩等高盐  
（2）以淀粉为惟一碳源   高温  
（3）无菌
（4）稀释涂布平板法   平板划线法   菌液浓度过高（或培养过程被杂菌污染）　增大稀释倍数（或严格无菌操作，原因与操作要对应）

点评 本题以筛选菌株为情境考查培养基的配制、接种方法、无菌技术等知识点．解题关键：熟悉微生物培养操作的基本原理、基本技术和操作流程，明确无菌技术的要素．