题目内容
【题目】科学家通过基因工程的方法，将苏云金芽孢杆菌的B毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株一一抗虫棉。其过程大致如图所示，请根据图示回答下列问题
（1）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，能把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA_______________________________的特点。
（2）扩增B毒蛋白基因的方法：___________________，此过程中利用到的物质有：__________。
（3）将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，导入植物细胞的方法还有______________。
（4）目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是________________，这需要通过检测才能知道，可利用_____________技术检测;还可以利用_____检测目的基因是否成功表达。
【答案】可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体DNA上 PCR（多聚酶链式反应） 模板DNA、引物、四种脱氧核苷酸、耐高温DNA聚合酶（Taq酶） 基因枪法、花粉管通道法 目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA上 DNA分子杂交技术 抗原—抗体结合
【解析】
1、分析题图：图示为抗虫棉的培育过程，首先获取目的基因，构建基因表达载体；其次采用农杆菌转化法将目的基因导入棉花细胞；最后采用植物组织培养技术将转基因细胞培育成转基因植株。
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
（1）当植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌上的TDNA可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。
（2）PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，可以在短时间内大量扩增目的基因；此过程中利用到的物质有：模板DNA、引物、四种脱氧核苷酸、耐高温DNA聚合酶（Taq酶）。
（3）将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，每种方法有其利弊，适合不同的受体细胞。导入植物细胞的方法有：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。
（4）目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA上；DNA分子杂交技术就是将转基因生物的基因组提取出来，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作标记，以此作为探针，使探针与基因组杂交，如果出现杂交带则表明已经将目的基因插入了受体细胞的染色体DNA上；检测目的基因是否成功表达可利用抗原—抗体特异性结合的特点。
