Question

19．多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，呈油状液体，污染土壤后，很难清除．研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株．
（1）培养基中加入多氯联苯作为唯一碳源，从功能上讲该培养基属于选择培养基．
（2）上述培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品稀释（溶解）．
（3）对初步提取到的菌株要进行纯化，一般操作方法有两种，如图是平板划线法．
（4）将酵母菌溶液分别稀释10、100、1000倍，每个浓度都接种3个平板，每个平板均接入0.1ml稀释液．经适当培养后，平板上的菌落数如表所示：

	1	2	3
10	4	6	3
100	47	50	41
1000	420	478	413

据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为4.6×10⁷个/L．

Answer 1

分析 1、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品稀释，接种到以多氯联苯为唯一碳源的培养基上；只有能分解多氯联苯的菌株才能在这样的培养基中生存，因此从功能上讲，该培养基属于选择培养基．
（2）培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品稀释（溶解）．
（3）对初步提取到的菌株要进行分离纯化，一般操作方法有两种，即平板划线法和稀释涂布平板法，图示是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．
（4）对菌落进行计数时，一般选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，因此选择稀释100倍的三个培养基进行计算，每升溶液中酵母菌活菌数=（47+50+41）÷3÷0.1×100×1000=4.6×10⁷个/L．
故答案为：
（1）唯一碳源   选择培养基
（2）高压蒸汽灭菌法   稀释（溶解）
（3）纯化    平板划线
（4）4.6×10⁷

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、培养基的类型及功能；识记接种微生物常用的两种方法，掌握计数微生物的两种方法，能结合所学的知识准确答题．