Question

15．如图为单克隆抗体制备流程示意图 请据图分析．

（1）图中过程①表示注射特定抗原，杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体．
（2）促进图中两种细胞融合最常用的方法是灭活的病毒，过程②只考虑细胞的两两融合，则可能会出现3种细胞，图中用HAT培养基培养的目的是筛选出杂交瘤细胞．
（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7-10分细胞/mL，在每个培养孔滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）．
（4）通过⑤可获得大量的单克隆抗体，在培养瓶要控制一定的CO₂浓度，原因是维持培养液的pH，此外还可以通过[④]小鼠腹腔内培养法获得单克隆抗体．
（5）若用¹⁵N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞器中出现的先后顺序是核糖体、内质网、高尔基体．

Answer 1

分析 1、单克隆抗体制备技术是动物细胞融合技术的应用之一，其基础是动物细胞培养．在制备单克隆抗体时，利用选择性培养基培养细胞，筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）．单克隆抗体是由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体．
2、据图分析，①过程是将特定的抗原注射小鼠，筛选出产生抗体的B淋巴细胞；②过程是诱导细胞融合；③过程是筛选出杂交瘤细胞：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，转移到HAT培养基中培养，未融合的细胞死亡，而杂交瘤细胞存活；④过程是通过小鼠腹腔中培养获得大量的单克隆抗体；⑤过程是培养液中培养获得大量的单克隆抗体．

解答 解：（1）图中过程①表示注射特定抗原，获得免疫的B淋巴细胞．杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞和效应B细胞的特点，既能无限增殖，又能产生特异性抗体．
（2）促进图中两种动物细胞融合最常用的方法是灭活的病毒，过程②只考虑细胞的两两融合，则可能会出现3种细胞：骨髓瘤细胞自身融合的细胞、效应B细胞自身融合的细胞、杂交瘤细胞，图中用HAT培养基培养的目的是筛选出杂交瘤细胞．
（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）．
（4）通过⑤培养液中培养可获得大量的单克隆抗体，在培养瓶要控制一定的CO₂浓度，原因是CO₂能维持培养液的pH，此外还可以通过④小鼠腹腔内培养获得单克隆抗体．
（5）若用¹⁵N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，单克隆抗体是分泌蛋白质，首先在核糖体中合成，在内质网上初步加工，之后内质网边缘以“出芽”形式冒出囊泡，囊泡离开内质网，转移到高尔基体上，与高尔基体膜融合，囊泡中的物质也进入到高尔基体中，在高尔基体中进一步加工成成熟的蛋白质，高尔基体膜也突起形成小泡，小泡离开高尔基体，转移到细胞膜上，小泡中物质释放到细胞膜外．因此放射性物质在细胞器中出现的先后顺序是核糖体、内质网、高尔基体．
故答案为：
（1）注射特定抗原        既能无限增殖，又能产生特异性抗体
（2）灭活的病毒         3      杂交瘤细胞
（3）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）
（4）维持培养液的pH       小鼠腹腔内培养
（5）核糖体、内质网、高尔基体

点评 本题以单克隆抗体制备流程阶段示意图为载体，考查单克隆抗体制备的过程，动物细胞培养的条件，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断，难度适中．