题目内容
【题目】菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答：
（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感）
（1）质粒是基因工程中最常用的载体，其化学本质是________，此外还可用______作为载体。
（2）下图限制酶M和N切割产生的黏性末端是__________，连接它们所需要的基本工具是___________________。
（3）为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用_______处理，使其处于感受态。
（4）将愈伤组织转移到添加__________、营养物质以及___________和琼脂的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。
（5）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2 龄幼虫，实验结果如下表所示。请据表回答：
组别 | 死亡率（%） | |
实验组 | 转基因植株1 | 60.00 |
转基因植株2 | 53.33 | |
对照组 | 13.33 | |
①对照组应饲喂等量的_________________________________________________。
②据表分析，_____________________________差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
【答案】（小型环状）DNA 噬菌体、动植物病毒 GATC—(—CTAG) DNA连接酶 Ca2+（或“CaCl2”） 一定浓度植物激素 卡那霉素 非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料的混合物 实验组与对照组死亡率
【解析】
基因工程常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒等，质粒上具有复制原点，能自我复制，本质是小型环状DNA；通常用氯化钙溶液处理微生物细胞，使之处于能够吸收周围DNA的状态；根据题意，若要初步筛选转基因菊花，可将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及卡那霉素的固体培养基中。
（1）质粒是基因工程中最常用的载体，其化学本质是小型环状DNA，此外还可用噬菌体、动植物病毒作为载体。
（2）下图限制酶M和N切割产生的黏性末端是GATC—(—CTAG)，连接它们所需要的基本工具是DNA连接酶。
（3）为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用CaCl2处理，使其处于感受态。
（4）根据题意，卡那霉素抗性基因kanR作为标记基因，故要筛选转基因菊花，需要将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及卡那霉素的固体培养基中。
（5）①该实验的自变量为菊花种类，因变量为菊天牛2龄幼虫死亡率，故对照组应饲喂等量的正常菊花嫩茎及叶片与人工饲料。
②据表格分析，实验组和对照组2龄幼虫死亡率差异显著，实验组死亡率高得多，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
