Question

1．研究分解纤维素的微生物在工业生产中有积极的意义．请回答下列问题：
（1）下面是分离纤维素分解菌的实验流程，请补全所缺内容：
土壤取样→①选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→②挑选产生透明圈的菌落．
（2）表为①过程中使用的培养基的配方．

纤维素粉	5g
NaNO3	1g
Na2HPO4•7H2O	1.2g
KH2PO4	0.9g
MgSO4•7H2O	0.5g
KCl	0.5g
酵母膏	0.5g
水解酪素	0.5g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000mL

该培养基是液体培养基还是固体培养基？液体培养基．该培养基对纤维素分解菌怎样进行选择？能分解纤维素的微生物才能大量繁殖，其他微生物则难以生存．
（3）菌落周围出现透明圈说明纤维素分解菌能分泌纤维素酶，并最终把纤维素分解成葡萄糖．
（4）在用平板计数法对分离的纤维素分解菌数目统计时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低 （填“高”、“低”或“相同”）．
（5）如图是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．
（6）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入有机磷农药制成选择培养基进行分离；若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是稀释涂布平板法．

Answer 1

分析 1、纤维素分解菌可以产生纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶．金属接种工具常用灼烧灭菌．刚果红染液与纤维素呈红色，纤维素分解菌在含有刚果红染液的培养基中形成的菌落会出现透明圈，可以用来鉴别纤维素分解菌．
2、微生物的培养基的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等，培养基需要使用高压蒸汽灭菌法灭菌，筛选目的微生物需要使用选择培养基．常用的微生物的纯化接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法．生物实验遵循的一般原则是对照原则、等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则．

解答 解：（1）分解纤维素的微生物的基本过程如下：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落
（2）根据表格分析，该培养基是液体培养基，该培养基以纤维素粉为碳源，能分解纤维素的微生物才能大量繁殖，其他微生物则难以生存，是一种选择培养基．
（3）菌落周围出现透明圈说明纤维素分解菌能分泌纤维素酶，并最终把纤维素分解成 葡萄糖．
（4）因是活菌计数，所以部分死亡菌无法计数．另外当菌落重合时，只能计数为一个菌落，所以偏小．
（5）如图是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．
（6）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入有机磷农药制成选择培养基进行分离；稀释涂布平板法对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数．
故答案为：
（1）选择培养 挑选产生透明圈的菌落
（2）液体培养基     能分解纤维素的微生物才能大量繁殖，其他微生物则难以生存
（3）纤维素酶    葡萄糖
（4）低       
（5）平板划线 稀释
（6）有机磷农药    稀释涂布平板法

点评 本题主要考查微生物的实验室培养、纤维素分解菌的鉴别等知识，意在强化学生对相关知识的理解与运用．题目难度中等．