题目内容
13．酵母菌在缺氧、pH为．4.5-6.0的条件下生长繁殖，而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制．某同学用果园土为实验材料，从土壤中分离纯化酵母菌．实验步骤如下：①土壤取样、制备样品液；
②配制培养基并灭菌、制作平板若干；
培养基A：PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖琼脂培养基
培养基B：PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖培养液
③用无菌吸管取样品液1ml，注入到有30ml培养基B的锥形瓶中，在30℃、无氧环境中培养24h；
④24h后，用另一支无菌吸管从锥形瓶中取培养液0．lml，分别接种到若干培养基A的平板上，倒置于37℃的恒温箱中培养48小时；
⑤镜检、菌种保藏．
请回答下列问题：
（1）根据实验结果，判断酵母菌的呼吸方式为兼性厌氧型．
（2）第②步配制的培养基，常采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌．
（3）第③步实验操作是否具有选择作用，有，说明理由无氧、乳酸的酸性条件可以抑制其它微生物的生长，而酵母菌生长繁殖．
（4）第④步的接种方法稀释涂布平板（或涂布平板）．
（5）某同学欲测定样品液中酵母茁数量，采用显微镜直接计数方便快捷并且仪器损耗较小．这样得出的结果往往比实际值偏高（填“偏高”、“基本不变”“偏低”），理由是计算时也包括了酵母菌死细胞（以及微小杂物）．
分析 1、酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃，其代谢类型属于兼性厌氧型，在有氧的条件下能够有氧呼吸大量繁殖，无氧条件下无氧呼吸产生酒精和二氧化碳．
2、两种纯化细菌的方法的比较
| 优点 | 缺点 | 适用范围 | |
| 平板划 线分离法 | 可以观察菌落特征，对混合菌进行分离 | 不能计数 | 适用于好氧菌 |
| 稀释涂布 平板法 | 可以计数，可以观察菌落特征 | 吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延 | 适用于厌氧，兼性厌氧 |
解答 解：（1）根据实验步骤可知，步骤③中“无氧环境中培养24h”，说明酵母菌能够进行无氧呼吸，而步骤④中“倒置于37℃的恒温箱中培养48小时”，说明酵母菌能够进行有氧呼吸．
（2）培养基常采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌．
（3）第③步中无氧、乳酸的酸性条件可以抑制其它微生物的生长，而酵母菌生长繁殖，因此该实验操作具有选择作用．
（4）根据实验操作步骤可知，第④步的接种方法．
（5）采用显微镜直接计数时，将活的酵母菌和死的酵母菌全部计数在内，因此该方法得出的结果往往比实际值偏高．
故答案为：
（1）兼性厌氧型
（2）高压蒸汽灭菌
（3）有
无氧、乳酸的酸性条件可以抑制其它微生物的生长，而酵母菌生长繁殖
（4）稀释涂布平板（或涂布平板）
（5）偏高 计算时也包括了酵母菌死细胞（以及微小杂物）
点评 本题考查微生物分离和培养，要求考生掌握选择培养基的特点，识记分离和纯化微生物常用的两种方法，掌握采用稀释涂布平板法计数微生物的具体过程，能结合所学的知识准确答题．
练习册系列答案
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1．免疫脂质体是将抗体通过聚合物结合在脂质体（双层磷脂分子构成）上构建而成的，它利用抗体特异性靶向作用，与肿瘤细胞表面的抗原结合，将脂质体包裹的药物送达病灶部位．这为乳腺癌的治疗提供了一种新途径．
（1）人类表皮生长因子受体-2（HER2）基因在乳腺癌发生早期具有高表达现象，提高了乳腺癌细胞的转移潜能．研究人员将HER2作为抗原刺激小鼠产生特异性（体液）免疫反应，获取免疫细胞后，制备单克隆抗体TMAB，其通过阻断人类表皮生长因子在HER2上的附着，产生抗肿瘤的效应．
（2）阿霉素是一种脂溶性小分子，可通过自由扩散方式进入细胞，抑制细胞增殖，但其毒副作用较大，利用脂质体将其包裹，通过缓释可以降低药物对机体的毒副作用．
（3）研究者将TMAB与包含阿霉素的脂质体融合，制备出新型的抗乳腺癌药物阿霉素免疫脂质体．为确定其作用效果，测定了不同条件下阿霉素进入细胞的量，实验设计及结果如下．
注：+表示添加；-表示不添加
和阿霉素脂质体相比，阿霉素免疫脂质体的药物入胞量更高．但a组阿霉素进入细胞的量最高，原因是阿霉素是脂溶性小分子，在a组中以自由扩散的方式进入细胞，速度较快，相同时间内进入细胞的量较多．
（4）为确认阿霉素免疫脂质体的靶向性，研究者设计以下实验，并测定了各组阿霉素进入细胞的量．实验中利用的a是HRE2基因不（低）表达的乳腺癌细胞（乳腺细胞）细胞，若第2组的阿霉素入胞量明显高于其他组，说明阿霉素免疫脂质体具有靶向性．
注：+表示添加；-表示不添加．
（1）人类表皮生长因子受体-2（HER2）基因在乳腺癌发生早期具有高表达现象，提高了乳腺癌细胞的转移潜能．研究人员将HER2作为抗原刺激小鼠产生特异性（体液）免疫反应，获取免疫细胞后，制备单克隆抗体TMAB，其通过阻断人类表皮生长因子在HER2上的附着，产生抗肿瘤的效应．
（2）阿霉素是一种脂溶性小分子，可通过自由扩散方式进入细胞，抑制细胞增殖，但其毒副作用较大，利用脂质体将其包裹，通过缓释可以降低药物对机体的毒副作用．
（3）研究者将TMAB与包含阿霉素的脂质体融合，制备出新型的抗乳腺癌药物阿霉素免疫脂质体．为确定其作用效果，测定了不同条件下阿霉素进入细胞的量，实验设计及结果如下．
| 组别 | 阿霉素 | 阿霉素脂质体 | 阿霉素免疫脂质体 | HER2基因高表达的乳腺癌细胞 |
| a | + | - | - | + |
| b | - | + | - | + |
| c | - | - | + | + |
和阿霉素脂质体相比，阿霉素免疫脂质体的药物入胞量更高．但a组阿霉素进入细胞的量最高，原因是阿霉素是脂溶性小分子，在a组中以自由扩散的方式进入细胞，速度较快，相同时间内进入细胞的量较多．
（4）为确认阿霉素免疫脂质体的靶向性，研究者设计以下实验，并测定了各组阿霉素进入细胞的量．实验中利用的a是HRE2基因不（低）表达的乳腺癌细胞（乳腺细胞）细胞，若第2组的阿霉素入胞量明显高于其他组，说明阿霉素免疫脂质体具有靶向性．
| 组别 | 阿霉素脂质体 | 阿霉素免疫脂质体 | HER2基因高表达的乳腺癌细胞 | a细胞 |
| ① | + | - | + | - |
| ② | - | + | + | - |
| ③ | + | - | - | + |
| ④ | - | + | - | + |
18．为了验证在有丝分裂过程中，染色体上的两条姐妹染色单体之间也可能发生部分交换，将植物分生区细胞置于含有BrdU的培养基中让其不断增殖，并在显微镜观察不同细胞周期的中期细胞．原理是DNA复制时BrdU可代替胸腺嘧啶脱氧核苷酸掺入到DNA子链中，经特殊染色后，DNA的一条单链掺有BrdU着色深，而DNA的两条单链都掺有BrdU则着色浅．下列说法正确的是（ ）
| A． | 若不发生部分交换，第一次分裂中期两条姐妹染色单体，一条着色较深，另一条较浅 | |
| B． | 若不发生部分交换，第二次分裂中期两条姐妹染色单体，一条着色较深，另一条较浅 | |
| C． | 若第一次分裂前期发生部分交换，则中期着色较浅的染色单体上一定有着色较深的部分 | |
| D． | 若第二次分裂前期发生部分交换，则中期着色较深的染色单体上不会有着色较浅的部分 |
观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 ⑧ 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用
1．下列关于运载体的叙述中，不正确的是（ ）
| A． | 运载体与目的基因结合后，得到的是一个重组DNA分子 | |
| B． | 在运载体上，要有多种限制酶的切点 | |
| C． | 目前最常用的有质粒、噬菌体和动植物病毒 | |
| D． | 具有某些标记基因，便于对其进行切割 |
3．下列有关乳酸菌的叙述，正确的是（ ）
| A． | 从生命系统的结构层次来看，既是细胞层次也是个体层次 | |
| B． | 具有与酵母菌结构相似的细胞膜，其细胞器中A和T的数量相等 | |
| C． | 观察其染色体形态结构和数目最佳的时期是有丝分裂中期 | |
| D． | 细胞的体积越大，相对表面积就越大，物质运输的效率就越高 |